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银屑病（Psoriasis）是一种以表皮过度增生和真皮慢性炎症反应为特征的常见皮肤病。银屑病的发病原因尚未完全清楚，但与遗传、免疫缺陷及感染有关。近年来，中药在治疗银屑病方面有着迅速的发展。蛇床子具有增加非特异性免疫功能、抗菌、抗炎、抗病毒、局部麻醉、抗变态反应及扩血管作用，与银屑病的痊愈机制有着密切的关系。但由于受传统剂型和中药提取工艺的局限，制约了蛇床子的开发和使用，其剂型多为软膏剂、洗剂使用不便，制剂中有效成分含量低、用药量大等。为了加速中药蛇床子素的现代剂型研究与开发，进一步探索蛇床子素对银屑病的治疗作用机制，本文优化了蛇床子有效成分蛇床子素的超临界CO2萃取工艺，设计研究了“抗银屑病蛇床子素贴剂（Osthol Patch For Antipsoriasis，OPA）处方，利用不同方法和技术对蛇床子素在皮肤中的分布进行了研究，并对蛇床子素的作用机制及贴其剂的药效学进行了研究。 采用正交实验法优化蛇床子中有效成分蛇床子素的萃取工艺，研究了萃取压力、温度、解析压力、颗粒大小、静态时间对蛇床子萃取物中蛇床子素含量的影响，筛选出较好的萃取条件为：萃取压力25～30MP，温度50～55℃，解析压力为5～7MP，颗粒粒度为40目，静态时间为1O min，从而提高蛇床子萃取物中蛇床子素含量，为中药蛇床子现代化奠定基础。 论文建立了蛇床子素的含量测定方法，测定了蛇床子素与经皮渗透有关的重要理化常数如熔点、溶解度、油水分配系数等。对蛇床子素经皮渗透进行研究，结果表明，蛇床子素透过离体大鼠皮肤的扩散行为符合零级动力学特征，测得表观渗透系数Pm为1.10×10-4(cm·h-1)。土荆芥油、薄荷油和氮酮作为渗透促进剂均对蛇床子素的经皮吸收有不同的增渗作用，增渗倍数分别为3.09、3.41和4.38。 通过对OPA的处方组成的研究，探讨了松香、琥珀酸、柠檬酸三乙酯对压敏胶性能的影响，从而优化筛选出安全有效的OPA的处方。 在猪、家兔两种不同的动物体内建立了在体动物耳静脉灌注模型，采用灌注液中乳酸脱氢酶活性和葡萄糖消耗量为指标评价灌注部位组织的生物活性，结果显示在8h内该模型具有较好的生物活性。在灌注液中加入伊文氏蓝用于监测灌注液体积变化，对准确计算出药物的渗透总量具有重要的意义。利用该模型研究了OPA的经皮渗透性，实验结果表明在猪、家兔两种动物体内药物的稳态流量分别为1.39、1.77μg·cm-2·h-1。 以离体人皮肤为模型皮肤，采用扩散池法考察了贴剂的经皮渗透性，12h累积透皮量为17.36μg·cm-2，稳定流量为1.52μg·cm-2·h-1，其渗透动力学曲线符合零级动力学，OPA具有较好的体外经皮渗透特性。应用传统的胶带粘贴和皮肤匀浆萃取技术分别测定了药物蛇床子素在角质层和去角质层皮肤的分布，实验结果表明，蛇床子素在角质层的滞留量较去角质层大，对银屑病局部治疗有着重要的意义，蛇床子素在角质层中的浓度高，可以形成药物贮库效应，药物可缓慢地扩散到皮肤的更深层而产生缓释的效果，本实验结果也与皮肤剥离实验结果基本一致。 将三维荧光光谱技术用于药物经皮渗透研究，研究了OPA经离体皮肤渗透后皮肤不同皮层的蛇床子素的分布。三维荧光光谱技术可不用对皮肤中药物进行提取，直接对皮肤切片进行三维荧光扫描，显著地提高了皮肤中蛇床子素的选择性和灵敏度。用等高线光谱图将皮肤中蛇床子素三维荧光图谱的信息在一个平面图上表征出来，能够反映蛇床子素的荧光光谱指纹特征，对皮肤中测定蛇床子素具有很高的特异性。实验结果表明，在角质层皮肤切片中的蛇床子素的荧光强度较去角质层皮肤切片中蛇床子素的荧光强度大，表明角质层皮肤切片中的蛇床子素含量较高，同胶带粘贴和皮肤匀浆萃取技术测沈阳药科大学博士研究生学位论文摘要定结果基本一致。 采用了鳞状表皮细胞体外细胞培养模型初步探讨了蛇床子素对银屑病的作用机制，结果表明，蛇床子素对鳞状表皮细胞增生代谢有显著的影响，高低剂量组（100、50ng·mL一’）的细胞存活率分别为14.31%、46.39%，蛇床子素在loong·tnL一’对培养鳞状表皮细胞高度敏感，能够显著抑制细胞的增殖，这对进一步研究蛇床子素治疗银屑病的作用机制具有一定的指导意义。药效学实验结果表明，蛇床子素对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂、对鸡蛋清所致大鼠足肿胀和对组织胺致豚鼠致痒闽的影响，高剂量组与空白对照组比较，有极显著性差异（P<0.01），与阳性对照比较无显著性差异（P习.05）。OPA对大鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成、对组胺致豚鼠皮肤毛细血管通透性增高反应以及对巴豆油引致的小鼠耳肿胀的影响，高剂量组与空白对照组比较，有极显著性差异（P<0.01），与阳性对照比较无显著性差异（P习.05）。 通过对 OPA对皮肤的急性毒性、刺激性及过敏性实验表明，OPA用于临床是安全的。 通过对1巧例银屑病患者采用开放式自体对照的方法进行临床研究，结果表明，OPA对银屑病治疗取得较满意的疗效，与维A酸霜组比较无显著差异。