糖精钠是一种人工甜味剂，有一定的毒性，一些发达国家都已对其严格控制使用。在我国，糖精钠超量使用现象严重。己烯雌酚是一种人工合成的雌性激素，对人体有致癌和致畸作用，世界各国均规定动物养殖中不得以任何途径和方式使用己烯雌酚。目前，由于利益驱使，人们在动物育种和饲养方面非法使用己烯雌酚现象较普遍。仪器法是检测上述药物的常用方法，但由于耗时长、费用高，并不适用于现场快速检测。而免疫分析法具有灵敏度与准确度高等优点，在筛选检测中应用广泛。因此，本文利用实验室前期制备的糖精钠与己烯雌酚多克隆抗体，通过探讨间接竞争ELISA(icELISA)和直接竞争ELISA(dcELISA)的条件优化，研制快速检测糖精钠与己烯雌酚ELISA试剂盒。　　 本文探讨了icELISA和dcELISA方法中包被原和抗体稀释倍数、抗体和标准品稀释液、反应时间等条件的优化，并结合国内外常用方法如灵敏度、特异性、准确度、精密度、保存期等方面评价试剂盒的性能指标。主要研究结果如下：1糖精钠ELISA检测方法研究　　 (1)icELISA法：检测时间80min，检测限为26.83ng/mL，IC50为846.76ng/mL，线性范围为67.09～6690.47ng/mL；dcELISA法：检测时间45min，检测限为8.02ng/mL，IC50为350.59ng/mL，线性范围为32.35～3799.91ng/mL，线性回归方程为y=-17.892x+99.908,R2=0.9969。　　 (2)由于糖精钠icELISA法比dcELISA法的检测限、IC50低，反应时间短，因此选择dcELISA法进行性能参数评价，结果得出：糖精钠抗体除了与糖精、苯并异噻唑啉-3-酮交叉反应率分别为97.45％和63.18%外，与其它药物均无交叉反应；回收率在87.66%～110.28%之间：批内变异系数＜11.5%，批间变异系数＜12.77%；HPLC与ELISA试剂盒检测添加回收与直接检测阳性样品含量结果的比对相关性系数R2分别为0.9815和0.9876；试剂盒在4℃保存期至少达到6个月。2己烯雌酚ELISA检测方法研究　　 (1)icELISA法：检测时间为60min，检测限为0.034ng/mL，IC50为1.09ng/mL，线性范围为0.08～8.17ng/mL，线性方程y=-18.395x+102.43，R2=0.9973；dcELISA法：检测时间为50min，检测限为0.058ng/mL、IC50为1.18ng/mL，线性范围为0.09～7.38ng/mL。　　 (2)由于己烯雌酚dcELISA法中包被原、酶标抗体使用量过大，成本高，且检测限和IC50高于icELISA，故选择icELISA法进行性能参数评价，结果为：抗体与双烯雌酚、己烷雌酚的交叉反应率分别为6.83%和2.56%，与其它药物均无交叉反应；回收率为78.57%～112.24%；批内变异系数＜11.1%，批间变异系数＜12.82%；HPLC与试剂盒检测添加回收结果比对的相关系数R2为0.9843；试剂盒在4℃可保存6个月。　　 本文研制的糖精钠与己烯雌酚ELISA试剂盒的各项参数都达到了国外试剂盒的指标和要求，可用于实际检测。