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目的: 研究电针对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)模型小鼠的治疗效应,并从稳定调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)与辅助性Th17细胞(The helper17cells,Th17)免疫平衡的角度,探讨电针治疗UC的作用机制,为临床针灸治疗UC提供更有益的科学依据。 方法: 24只健康雄性昆明小鼠,采用浓度为3%的葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)法建立UC模型。造模5天成功后,再随机分为两组,分别为模型组、电针组,每组8只小鼠,另选择体重年龄相当的8只健康雄性小鼠作为空白组。电针组选取“关元、足三里”连续治疗5d,每日于固定时间治疗10min,余两组只捆绑不治疗。观察各组小鼠体重、大便粘稠度及便血情况,根据疾病活动指数(Disease Activity Index,DAI)评分表计算疾病活动指数;剖取结肠,观察结肠大体形态;摘取脾脏,观察脾脏大体形态。研磨脾脏,分离脾脏淋巴细胞制备细胞悬液,采用FITC、PE、PerCP-cy5.5标记CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞及其相应同型对照PE Rat IgM同型对照-CD25、Rat IgG2a K同型对照PerCP-cy5.5-Foxp3,采用FITC、PE、PerCP-cy5.5标记CD3+CD8+IL-17+Th17细胞及其相应同型对照Rat IgG2a K同型对照PerCP-cy5.5-IL-17,刺激孵育、重悬洗涤脾单核细胞悬液,运用流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞Treg、Th17细胞含量。 结果: 1.电针对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠的治疗效应: (1)一般情况:模型组小鼠精神欠佳,毛发晦暗,懒动少食,体重下降,便质稀软,见肉眼血便,DAI指数明显升高,与模型组相比,电针组小鼠精神转佳,毛发较有光泽,便质较干软,肉眼血便明显改善,DAI指数明显降低,分析后有统计学差异(p<0.05)。 (2)结肠大体形态观察:通过观察比较每组结肠大致形态,与空白组相比,模型组小鼠结肠长度变短,肠壁略肿胀,肠粘膜溃疡充血。与模型组相比,电针治疗UC模型小鼠后,结肠长度、肠壁肿胀度、肠黏膜充血溃疡糜烂情况均有所好转。 (3)脾脏大体形态观察:通过观察比较每组脾脏大致形态可知,与空白组相比,模型组小鼠脾脏出现肿胀,红润度减少,表面粗糙,与模型组相比,电针组小鼠脾脏肿胀减轻,红润度恢复,表面较光滑。 2.电针调节DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠脾脏Treg/Th17免疫平衡: 与空白组比较,模型组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量明显下降,CD3+CD8+IL-17+Th17细胞水平明显上调,分析后有统计学差异(p<0.05);电针治疗后,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量上升,CD3+CD8+IL-17+Th17细胞含量下降,差异具有统计学意义(p<0.05)。 结论: 电针治疗UC模型小鼠疗效确切,与改善脾脏Treg/Th17水平有关,这可能是针灸治疗UC的重要机制。