论文部分内容阅读
目的： 研究电针对溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis,UC）模型小鼠的治疗效应，并从稳定调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)与辅助性Th17细胞（The helper17cells,Th17）免疫平衡的角度，探讨电针治疗UC的作用机制，为临床针灸治疗UC提供更有益的科学依据。 方法： 24只健康雄性昆明小鼠，采用浓度为3％的葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium，DSS）法建立UC模型。造模5天成功后，再随机分为两组，分别为模型组、电针组，每组8只小鼠，另选择体重年龄相当的8只健康雄性小鼠作为空白组。电针组选取“关元、足三里”连续治疗5d，每日于固定时间治疗10min，余两组只捆绑不治疗。观察各组小鼠体重、大便粘稠度及便血情况，根据疾病活动指数（Disease Activity Index，DAI）评分表计算疾病活动指数；剖取结肠，观察结肠大体形态；摘取脾脏，观察脾脏大体形态。研磨脾脏，分离脾脏淋巴细胞制备细胞悬液，采用FITC、PE、PerCP-cy5.5标记CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞及其相应同型对照PE Rat IgM同型对照-CD25、Rat IgG2a K同型对照PerCP-cy5.5-Foxp3，采用FITC、PE、PerCP-cy5.5标记CD3+CD8+IL-17+Th17细胞及其相应同型对照Rat IgG2a K同型对照PerCP-cy5.5-IL-17，刺激孵育、重悬洗涤脾单核细胞悬液，运用流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞Treg、Th17细胞含量。 结果： 1.电针对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠的治疗效应： （1）一般情况：模型组小鼠精神欠佳，毛发晦暗，懒动少食，体重下降，便质稀软，见肉眼血便，DAI指数明显升高，与模型组相比，电针组小鼠精神转佳，毛发较有光泽，便质较干软，肉眼血便明显改善，DAI指数明显降低，分析后有统计学差异（p＜0.05）。 （2）结肠大体形态观察：通过观察比较每组结肠大致形态，与空白组相比，模型组小鼠结肠长度变短，肠壁略肿胀，肠粘膜溃疡充血。与模型组相比，电针治疗UC模型小鼠后，结肠长度、肠壁肿胀度、肠黏膜充血溃疡糜烂情况均有所好转。 （3）脾脏大体形态观察：通过观察比较每组脾脏大致形态可知，与空白组相比，模型组小鼠脾脏出现肿胀，红润度减少，表面粗糙，与模型组相比，电针组小鼠脾脏肿胀减轻，红润度恢复，表面较光滑。 2.电针调节DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠脾脏Treg/Th17免疫平衡： 与空白组比较，模型组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量明显下降，CD3+CD8+IL-17+Th17细胞水平明显上调，分析后有统计学差异（p＜0.05）；电针治疗后，CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量上升，CD3+CD8+IL-17+Th17细胞含量下降，差异具有统计学意义（p＜0.05）。 结论： 电针治疗UC模型小鼠疗效确切，与改善脾脏Treg/Th17水平有关，这可能是针灸治疗UC的重要机制。