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本文从黄淮海地区采集大豆根瘤,分离、纯化、回接确认大豆根瘤菌株后,进行IGS-RFLP初步分型,筛选与大豆品种中黄13匹配的菌株并进行荧光标记,采用蛭石盆栽实验测定标记菌株的竞争结瘤能力,选取竞争结瘤能力有显著差异的菌株进行了蛋白质组学初步分析,以探寻其竞争结瘤差异的原因和影响因子。本文结果为筛选强竞争结瘤能力的大豆根瘤菌株提供依据,从而实现接种菌株的结瘤固氮功效。论文结果如下:从河南、安徽、山东等地的大豆根瘤中,经过分离、纯化、回接确定大豆根瘤菌190株,用IGS PCR-RFLP可将菌株分成了28个类型;选择每类的代表菌株与中黄13进行匹配性试验,获得与该品种匹配性好的根瘤菌5株,分别是2株快生大豆根瘤菌S. fredii USDA205和S. fredii SR25a、3株慢生大豆根瘤菌B. japonicum 4222、4230和4534。将绿色荧光蛋白基因(gfp gene)或红色荧光蛋白基因(rfp gene)分别导入这5株大豆根瘤菌中,标记菌株中的外源基因在传代培养和共生条件下均能够遗传稳定,且不影响共生结瘤固氮行为,本标记方法可用于评价菌株竞争结瘤能力。将带有不同荧光蛋白基因的5株根瘤菌两两组合,通过蛭石盆栽实验筛选出了竞争结瘤能力较强的菌株B. japonicum 4534和竞争结瘤能力较差的菌株B. japonicum 4222。用大豆苷元分别处理B. japonicum 4534和B. japonicum 4222,其蛋白质表达分析表明,菌株4534有14个蛋白发生上调,10个蛋白发生下调;而菌株4222有6个蛋白发生上调,4个蛋白发生下调。通过MOLDI-TOF质谱鉴定差异表达蛋白,确定了菌株4534的7个差异蛋白以及菌株4222的3个差异蛋白。B. japonicum 4534经大豆苷元刺激后差异表达蛋白主要是代谢相关蛋白、转运蛋白;B. japonicum 4222差异蛋白主要是代谢、转录及翻译相关蛋白。用大豆苷元及对方的胞外物质分别处理菌株4534及菌株4222,菌株4534有43个蛋白上调,35个蛋白下调,鉴定了44个;菌株4222则有25个蛋白上调,22个蛋白下调,鉴定了16个。菌株4534的差异蛋白主要是鞭毛蛋白、转录相关蛋白、代谢相关蛋白、分子伴侣、转运蛋白、翻译相关蛋白、防御蛋白;而菌株4222的差异蛋白主要是代谢相关蛋白、分子伴侣、翻译相关蛋白。在这两种处理下,菌株4534均比菌株4222产生更多的蛋白响应,代谢相关蛋白为结瘤过程提供能量和碳架;转运蛋白能增强结瘤因子的分泌,提高根瘤菌的亲和匹配性;鞭毛蛋白的上调能提高菌株的运动性,从而提高菌株的竞争结瘤能力;分子伴侣、翻译相关蛋白能够提高某些蛋白的正确折叠以及表达水平。根瘤菌菌株对大豆苷元及胞外物质引起响应的不同结果,是产生竞争结瘤能力差异的原因之一。