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研究目的： 探究人类长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)在上皮性卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞自噬的影响。 研究方法： 1.采用荧光定量PCR检测MEG3在23例上皮性卵巢癌组织、16例正常卵巢组织及四株上皮性卵巢癌细胞(OVCAR3、A2780、SKOV3和HO-8910)中的表达；并分析部分临床病理参数（FIGO分期、组织分级及类型）中MEG3的表达差异。 2.以正常卵巢组织中的cDNA为模板，根据GenBank提供的MEG3基因序列（NR_002766.2）设计特异性引物，PCR扩增目的基因，先由DNA限制性内切酶KpnⅠ与EcoRⅠ双酶切，经T4DNA连接酶连接，确保MEG3基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中以后，再利用PCR、限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定重组质粒。 3.体外瞬时转染细胞实验分三组：实验组，转染pcDNA3.1(+)-MEG3重组质粒；阴性对照组，转染pcDNA3.1(+)空质粒；空白对照组，转染磷酸盐缓冲液(PBS)。采用荧光定量PCR检测转染24h、48h、72h后OVCAR3细胞中MEG3和Atg5mRNA表达变化；采用透射电镜观察OVCAR3细胞超微结构的变化；采用单丹（磺）酰戊二胺(MDC)染色，倒置荧光显微镜下观察自噬囊泡；采用免疫印迹检测自噬关键基因Beclin1、Atg5和LC3的蛋白表达水平。 研究结果： 1.MEG3在上皮性卵巢癌中表达水平较低，相对于正常卵巢组织表达量(2-△△CT)为0.138±0.15，差异有统计学意义(p<0.05)。上皮性卵巢癌组织中，FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期的卵巢癌患者MEG3表达明显低于Ⅰ～Ⅱ期，差异有统计学意义(p<0.05)；MEG3在卵巢癌患者不同组织分级和组织学类型之间，差异均无统计学意义(P>0.05)。 2.MEG3在OVCAR3、A2780、SKOV3和HO-8910细胞中均有表达，其中在OVCAR3细胞中的相对表达水平最低，与其他三株细胞之间，差异均有统计学意义(p<0.05)。 3.经PCR、限制性内切酶酶切和DNA测序证实pcDNA3.1(+)-MEG3重组质粒构建成功。 4.体外瞬时转染24h、48h、72h后，实验组MEG3、Atg5mRNA表达显著高于阴性和空白对照组，在48h达到峰值，差异具有统计学意义(p<0.05)；透射电镜下实验组可见较多自噬小体形成；倒置荧光显微镜下实验组MDC阳性细胞比例明显增加，差异具有统计学意义(p<0.05)；免疫印迹显示实验组LC3-Ⅱ、Beclin1和Atg5的蛋白表达量明显高于阴性和空白对照组。 研究结论： 长链非编码RNAMEG3在上皮性卵巢癌组织中的表达水平较低，且与患者的FIGO分期相关，提示其可能参与卵巢癌的发生发展；体外瞬时转染MEG3质粒可促进OVCAR3细胞自噬囊泡和自噬小体形成，并提高自噬相关生化指标的表达水平，提示其可能促进上皮性卵巢癌细胞自噬的发生。