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秦皮乙素是中药秦皮香豆素类有效成分之一,具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗微生物等广泛的药理作用,而其抗肿瘤作用的机制尚未有研究。本文采用体外实验研究方法对秦皮乙素的抗肿瘤作用及机制进行研究,利用细胞生物学、免疫组化等方法,探讨秦皮乙素是否通过死亡受体途径来诱导肿瘤细胞的凋亡。实验用MTT法、SRB法考察秦皮乙素对人胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用,结果显示秦皮乙素具有抑制SGC-7901细胞生长的作用,并呈剂量依赖性。给药作用48h后,MTT法测得秦皮乙素对SGC-7901细胞的ICso为0.54mmol·L-1：SRB法测得秦皮乙素对SGC-7901细胞的GIso为0.286mmol·L-1。透射电子显微镜观察SGC-7901细胞超微结构的结果显示,秦皮乙素不同剂量(0.28mmol·L-1、0.56mmol·L-1、1.12m mol·L-1‘)作用48h后,出现细胞微绒毛消失,细胞核内染色质固缩、集边,形成凋亡小体等一系列特征性的凋亡形态学改变。FCM检测SGC-7901细胞凋亡率的结果显示,秦皮乙素不同剂量作用48h后对SGC-7901细胞的凋亡率分别为14.20%、31.28%、54.13%,细胞凋亡率呈明显的剂量依赖性。在以上实验基础上,我们考察了秦皮乙素诱导SGC-7901细胞凋亡的途径。在秦皮乙素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡机制研究中,采用免疫组化法检测秦皮乙素对死亡受体途径相关蛋白Fas、FasL、FADD的表达以及酶标仪来检测Caspase-8, Caspase-3的活性。结果显示秦皮乙素三个剂量(0.28mmol·L-1、0.56mmol·L-1和1.12mmol·L-1)作用SGC-7901细胞24h后,Fas蛋白表达率分别为37.28%,59.70%,85.23%,与空白对照组比较差异非常显著(P<0.01)；FasL蛋白表达率分别为40.11%,60.38%,87.23%,与空白对照组比较差异非常显著(P<0.01)；FADD的蛋白表达率分别为36.98%,52.34%,86.64%,与空白对照组比较差异非常显著(P<0.01)。以上结果显示,秦皮乙素对Fas、FasL、FADD蛋白表达具有上调作用,且具有一定的剂量依赖性。酶标仪检测Caspase-8活性,其OD值分别为0.118,0.288,0.345(P<0.01)：Caspase-3活性的OD值分别为0.141,0.234,0.338(P<0.01)；表明秦皮乙素作用后细胞内Caspase-8和Caspase-3活性均增强。且三个剂量间成剂量依赖性。综上所述,秦皮乙素在体外可以通过诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡来达到抗肿瘤作用,其诱导肿瘤细胞凋亡的机制可能是通过促进死亡受体途径相关蛋白Fas, FasLFADD的表达,并形成聚合体促进Caspase-8, Caspase-3的表达,从而诱导SGC-7901细胞凋亡。