人肿瘤坏死因子结构-功能关系研究

来源 :中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangwei4833250
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为了能够更好地说明和了解hTNFα结构与活性及毒性的关系,并更有效地设计出新的高效低毒hTNFα衍生物,该论文从hTNFα与其受体在三维结构水平上的相互作用入手,分析了hTNFα的结构-功能关系及其与两种受体结合的异同之处,发现了些新的结合位点,并依 此设计和制备了一系列可能具有受体选择和/或高效低毒的hTNFα突变体.另外,还设计和 制备了一种由hTNFα与人转化生长因子第三环区(hTNF3)组成的新型融全蛋白(TLT).随后对这些hTNFα衍生物进行了表达研究、分离纯化及部分生物学活性的测定.为了得到可溶性高效表达,还构建了两种新的原核高效表达载体pLC和pRC,并将之用于上述hTNFα衍生物的表达,取得了令人满意的结果.另一方面,克隆了两株新的中和性抗hTNFα单抗的可变区基因,并对之进行了序列及空间结构的分析.同时结合计算机模拟及相关实验研究,对两株单抗与hTNFα之间可能的相互作用模式及作用位点进行了预测,该研究结果为下一步设计和制备新的抗hTNFα抑制剂创造了条件.
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