双氢青蒿素抑制人结肠癌HCT116细胞增殖和诱导凋亡的实验研究

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目的:在国内外对青蒿素抗肿瘤的研究基础上,通过继续深入研究,采用细胞培养的实验研究手段来明确其在结肠癌方面的作用,扩大其抗肿瘤的作用范围。通过细胞培养,观察抑制率及细胞周期变化等方面来研究双氢青蒿素(DHA)对人结肠癌HCT116细胞增殖的影响,明确双氢青蒿素抑制人结肠癌HCT116细胞的作用机理,为其临床应用提供科学依据。方法:本实验采用体外细胞模型,运用MTT检测法及流式细胞仪检测法。MTT检测法:首先将细胞分为加药组及对照组,在培养板上培养后加入MTT,在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值(OD),计算抑制率和DHA的IC50值,观察HCT¨6细胞在不同浓度和时间双氢青蒿素作用下的抑制率。流式细胞仪检测法:将细胞在培养瓶内培养后,加入PI染液,在流式细胞仪上作细胞周期分析,计算各个阶段中细胞所占的比例,观察双氢青蒿素对HCT116细胞增殖和细胞周期的影响。统计学处理:用SPSS17软件包,进行t检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果:观察各组抑制率的结果显示:双氢青蒿素对人结肠癌HCT116细胞具有明显的体外增殖抑制作用,且有明显的时间及剂量依赖关系,48h的IC50是300nmol/L。结果见表3、图1。观察各组细胞周期所占比例显示:人结肠癌HCT116细胞周期发生改变,双氢青蒿素可以引起人结肠癌HCT116细胞周期阻滞于G0/G1期。见表4、图2。结论:双氢青蒿素能够抑制人结肠癌HCT116细胞增殖,这可能与抑制HCT116细胞增殖周期有关。
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