草石蚕多糖的提取及其性质研究

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草石蚕(Stachys sieboldii Miq.)是多年生草本植物,具有祛风除湿,清热解毒的作用。在《本草纲目》、《陆川本草》中均有记载,富含多种植物多糖。多糖广泛地存在于自然界中,它是现代生物机体内除核算和蛋白质外最重要的成分,能够对机体发挥诸多作用。其中,多糖能够维持机体基本生物活性,能够发挥促进糖蛋白形成、识别脂多糖、加工和形成蛋白质等功能。本课题对草石蚕多糖的提取、分离工艺进行研究,并对其抗肿瘤作用、免疫作用、抗氧化活性和抗菌活性等活性进行了分析比较,为草石蚕的利用与开发提供相应的技术参考。主要结论如下:(1)草石蚕多糖最佳工艺条件:水浸提法,提取温度为79.0℃,提取时间为2.8h,料液比1:18.5:,用81.2%乙醇沉淀提取,水浸提草石蚕多糖提取率为4.89%。超声波提取草石蚕多糖最佳工艺条件为超声波功率为156.4W,超声波时间为65.4min,料液比1:16.7,醇沉浓度为75.1%,提取率为6.86%。比较而言,超声波辅助提取法效果更佳,可用于工业化提取。(2)草石蚕粗多糖脱蛋白最佳工艺条件为蛋白酶添加量为125.6U/mL,酶解温度为30.0℃,酶解时间为96.1min,pH为5.4。脱色最佳工艺条件:活性炭添加量为2.5%,温度为50℃,吸附时间为40min。(3)草石蚕多糖对细菌、霉菌和酿酒酵母都有很强的抑制效果,其抗菌谱较宽。草石蚕多糖对金黄色葡萄球菌和根霉的最小抑菌浓度(MIC)为6.25%,对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的MIC为12.5%,对沙门氏菌、黑曲霉和酿酒酵母的MIC为25%。(4)草石蚕多糖对DPPH·、·OH和O2-·都有较强清除能力,随着草石蚕多糖浓度的增加,其清除能力逐渐增强,明显高于对照组BHT,且草石蚕多糖具有较好的抗脂质过氧化能力,随着草石蚕多糖浓度增加,抗脂质过氧化能力逐渐增强。(5)草石蚕多糖对肿瘤细胞株有较强的抑制作用,在试验浓度范围内,随着草石蚕多糖浓度的增加,其抑制作用也逐渐增强,呈现较好的量效关系。草石蚕多糖具有较好的刺激淋巴细胞增殖的能力。当草石蚕多糖浓度为0.2~0.8mg/mL时,随着草石蚕多糖浓度的增加,其刺激淋巴细胞增殖的能力也逐渐增强,呈现较好的量效关系,当草石蚕多糖浓度超过0.8mg/mL,其刺激淋巴细胞增殖的能力反而下降。
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