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目的 异基因骨髓移植与外周血干细胞移植是许多血液、遗传病及恶性肿瘤放、化疗后的重要治疗手段，它为患者提供了长期缓解或根治的机会。移植后，产生的移植物抗宿主病（Graft-Versus-Host Disease，GVHD）特别是aGVHD（acute Graft-Versus-Host Disease，aGVHD）是主要的并发症。因此，预防和治疗aGVHD是当前骨髓移植急待解决的课题之一。 目前认为，供、受者主要和次要组织相容性抗原的差异是引起aGVHD的根本原因。其中T细胞具有至关重要的作用。其中CD8+T细胞，主要是CTL细胞可直接攻击靶细胞。而CD4+T细胞（Th1、Th2）则可通过产生的各种细胞因子促进aGVHD的发生、发展。基于上述理论，目前临床防治aGVHD的主要方法是：1、应用药物预防aGVHD，常用的有皮质激素、CsA、MTX、FK-560等。2、应用各种单克隆抗体，如应用针对T细胞的单克隆抗体，以清除T细胞；或将“自杀”基因导入供者T细胞，以调控供者T细胞的数量；3．针对某些细胞因子的单克隆抗体，减轻该细胞因子的作用；针对粘附分子的单克隆抗体，以阻断其作用等。4．其他某些新药物如Rapamycin、青霉胺、IL-10也等正开展实验研究或试用临床。上述方法均有明显不足之处，清除或减少T细胞则会导致骨髓移植的失败，如白血病的复发；长期应用较强的免疫抑制剂可致严重感染和损伤肝、肾等脏器。临床实践证明：这些药物在提高生存率方面并不理想。如CsA虽有较高的治疗有效率，但并不改善生存率。目前，国内、外各大骨髓移植中心尚无统一的治疗方案，多采用以上药物2-3种联合应用，但却增加了感染病死率，效果也并不好。这些药物或方案不理想的主要原因是：与抗宿主对移植物的排斥反应不同，引起aGVHD的因素同时也有所谓移植物抗白血病效应（graft-versus-leu-kemia，GVL），因此，抗aGVHD时，要求在抑制移植物抗宿主反应作用的同时，还要保留抗白血病效应，过强的免疫抑制作用可以使GVL作用丧失而导致骨髓移植的失败。因此，寻找较温和的药物或方法，使aGVHD即能减轻，又可保留GVL作用，近几年一直受到国内、外学者的关注。 雷公藤（Tripterygium Wilfordii Hook．f，TWH）系卫矛科雷公藤属木质藤本植物，广泛分布于我国西南、华南及东北地区，为我国首先发现的免疫调节药物。目前，国内外学者已从雷公藤属植物分离出近70种化学成分，主要为生物碱类、二两类、三前类、倍半路类及糖类。雷公藤多成是从’I’WH中分离出来的1个含有微量二席类，少量生物碱及一些三能类化合物。 多年来我们一直从事对雷公藤多成（Glucosidorum TiPterygii Tororum，Gt）的实验研究，证明雷公藤多成可降低T细胞及亚群的数量，IL—2的产生及IL－ZR的表达，使T细胞对IL－2的反应性下降，抑制T细胞表面粘附分子＊D；l卜CD；s等)的表达；且可使异基因移植皮片存活时间明显延长。其抗排斥反应作用介于甲基强地松龙与CSA之间，与两者伍用有更明显的抑制作用，即雷公藤多成具有较温和而明显的抑制T细胞及其分泌的细胞因子的作用。此外，雷公藤多式还具有抗炎、抗肿瘤作用等。这些研究结果提示：可望用雷公藤多成或伍用雷公藤多成防治aGVHD、保留GVL6因此，本研究拟应用或伍用雷公藤多成，阐明其防治aGVHD的作用及机制。以期将来在防治。GVHD方面，获得疗效显著，更符合我国国情的新药应用于临床提供实验依据。 方 法 一、动物模型复制 供鼠BAWC(H－2勺雌性；同基因移植受鼠BALB／C(H－2勺雄性；异基因移植受鼠 C。FI／6(H－21雄性。各组小鼠均为 8－12周龄，体重209左右。骨髓移植当天颈椎脱日法处死供鼠，在超净台内无菌取供鼠脾脏及双侧股骨骨髓刀℃下将脾脏在尼龙网上研磨过滤制成细胞悬液，用淋巴细胞分层液分离脾淋巴细胞，用RPMll640液调脾淋巴细胞浓度为2 X10’／Inl。同时，剪开股骨于既端，用6号半针头，吸人一定量RPMll640液，冲出骨髓液，反复3次，而后通过4号针头3次，使其成为单细胞悬液，调骨髓细胞浓度为 4 X 10勺Inl。将脾细胞与骨髓细胞接体积 1：二混合，制成混合细胞悬液问MC人受鼠在骨髓移植前24h内应用直线加速器全身照射，总剂量为1800cGy，剂量率为200Gy／ndn，将制成的混合细胞悬液经尾静脉输给受鼠BAWC（同基因移植）与受鼠C。BL／6(异基因移植入每只输人0．sml，含骨髓细胞 IX 10‘个，脾淋巴细胞 5 X 10‘个，制成 dGVHD模型。 ·2· 二、实验分组及处理 移植后将受鼠随机分成5组，同基因移植组，异基因移植组，CsA＋M’IX组，G’I’f组，G’IT＋CsA组。于无菌室内饲养，食料及水均高压灭菌，饮水中加人庆大霉素O20m矿LX红霉素p50m矿L人从移植当日起，同基因移植组与异基因移植组受鼠，每日腹腔注射生理盐水 0．ZInl，CSA＋MTh组受鼠，每日腹腔注射＆．smgr｝g，第 1＊jJ天腹腔注射 MIX7mg／M＼Gh组受鼠每日腹腔注射 G’IT瞩 人 Gh＋CsA组受鼠每日腹腔注射 Gi．smgikg人．sing／kg／gy用吐温 80溶解制成 l