黄原胶液化酶的研究

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XT11菌种经过发酵能够产生黄原胶液化酶,该酶能够分解黄原胶,将这种阴离子杂多糖降解成寡糖,从而使其粘度降低。寡糖作为一种低糖链物质,能有效促进人体内双歧杆茵等有益菌成倍乃至百倍地自然增殖,可以调节肠道功能、改善人类常见的功能性便秘、腹泻等症状。因而使得本论文的研究更富有实际意义。本实验研究酶学性质所用的酶化液是经硫酸铵沉淀所得到的粗酶液,实际生产中应用的酶液应经进一步分离提纯得到。本实验要对黄原胶液化酶的酶学性质进行研究,并对黄原胶液化酶的分离纯化进行研究。对酶反应最适底物的影响,酶反应线性时间,酶反应最适温度和最适pH值以及酶的热稳定性和pH值稳定性进行了研究。确定酶分离纯化的条件。现确定酶的初步分离采用硫酸铵盐析法,其饱和度为35%~70%,酶反应的线性时间为18min。酶反应的最适温度为40℃;以磷酸盐缓冲液为最佳缓冲液的酶反应的最适pH值为6.0。米氏方程的Km是1.68,Vmax是20.37。酶液在3℃以上的稳定性不好,容易失活,对pH值较敏感。酶液经过阴离子交换柱纯化。最后通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳对发酵液、粗酶液和纯化后酶液进行比较鉴定。
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