不同的补肾方法对大鼠骨折愈合过程中Osx、TGF-β1表达影响的实验研究

来源 :甘肃中医学院 | 被引量 : 3次 | 上传用户:fishe1042
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目的:建立大鼠左侧胫骨中段骨折的动物模型,观察不同的补肾方法对大鼠骨折愈合过程中Osx、TGF-β1表达的影响,为其能促进成骨细胞分化,促进骨折愈合提供一定的理论依据。方法:选用250±20g,SPF级wistar大鼠96只,随机分为4组,每组24只,分别为A蒸馏水组、B补肾壮筋汤组、C左归丸组、D右归丸组。采用三点弯曲法造成左胫骨中段闭合性骨折的动物模型,术后用自制小夹板(长2cm、宽0.25cm三合板制成)固定。造模6小时后给予药物干预,分别于术后1、2、4周每组8只大鼠经腹腔麻醉后行X线检查、骨折处骨痂定量的比较以观察不同的补肾方药对骨折愈合的疗效差异,然后处死动物取出骨质标本,并放置于4%多聚甲醛中;制作切片,采用免疫组化方法处理,观察各组大鼠骨痂的Osx、TGF-β1因子表达情况,并用ImagePro plus6.图像分析软件对骨痂标本阳性表达细胞的平均光密度值(MOD)进行测定。对实验数据采用spss17.0软件进行统计分析。结果: X线片检查,B、C、D用药组与A蒸馏水组比较,术后第1周骨折断端的X线影像学无明显差异,术后第2、4周B、C、D用药组骨折愈合快于A蒸馏水组,B组骨折愈合快于C、D组,C组骨折愈合快于D组。各时段骨折断端骨痂定量比较,术后第1周各组无明显统计学意义,术后第2、4周B组骨折断端骨痂含量显著高于A组(P<0.01),C、D组骨折断端骨痂含量明显高于A组(P<0.05),B组骨折断端骨痂含量明显高于C、D组(P<0.05),C组骨折断端骨痂含量明显高于D组(P<0.05)。A、B、C、D组骨痂标本免疫组织化学结果提示:各组Osx、TGF-β1表达水平从术后第1周到第2周逐渐增强,术后第4周呈现下降趋势。术后1、2、4周B、C、D组的Osx、TGF-β1的阳性细胞数的平均光密度值(MOD)显著高于A组(P<0.05),B组Osx、TGF-β1的阳性细胞数的平均光密度值(MOD)明显高于C、D组(P<0.05),C组Osx、TGF-β1的阳性细胞数的平均光密度值(MOD)明显高于D组(P<0.05),均在2周时阳性表达达到高峰。结论:补肾壮筋汤、左归丸、右归丸均有促进Osx、TGF-β1表达作用,补肾壮筋汤较左归丸、右归丸促进骨折愈合过程中Osx、TGF-β1因子表达水平显著。补肾壮筋汤比左归丸、右归丸更能加速骨折局部骨痂的形成,促进骨折愈合。
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