【摘 要】
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目的:将小鼠骨髓来源的DC细胞和小鼠SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,同时以CD44v6进行修饰,研究CD44v6修饰的DC融合瘤苗抗肿瘤作用及其作用机制,为肿瘤免疫治疗提供实验依据及理论
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目的:将小鼠骨髓来源的DC细胞和小鼠SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,同时以CD44v6进行修饰,研究CD44v6修饰的DC融合瘤苗抗肿瘤作用及其作用机制,为肿瘤免疫治疗提供实验依据及理论基础。方法:(1)以pBud作为真核表达载体,选择CD44v6编码基因进行PCR扩增,构建重组表达质粒;(2)取小鼠骨髓细胞在细胞因子GM-CSF、IL-4、TNF-α的诱导下体外大量扩增DC细胞;(3)在PEG的作用下,进行DC细胞和SP2/0细胞的融合,并利用HAT/HT系统筛选出纯净融合细胞株;(4)Lipofectamine 2000的介导下,将pBud-CD44v6转染到肿瘤融合细胞中表达;(5)检测融合细胞瘤苗体外对肿瘤细胞的杀伤效应,测量细胞毒活性;(6)荷瘤小鼠接种融合瘤苗,测量肿瘤大小及观测小鼠的生存期。结果:成功构建了CD44v6修饰的DC/SP2/0融合疫苗;免疫组细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性明显大于对照组,肿瘤体积明显小于对照组,小鼠生存期延长。结论:小鼠骨髓来源的DC细胞在PEG作用下成功与SP2/0细胞融合,同时以CD44v6加以修饰,且融合细胞可有效诱导T淋巴细胞产生强大抗肿瘤免疫作用。
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