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研究背景肝细胞肝癌是世界范围内最常见的10大恶性肿瘤之一,从全球而言,在各种肿瘤致死的原因中,肝癌在男性列第2位,女性列第6位,其的发病率具有地区分布差异性,而我国是肝细胞肝癌的高发区,每年发病人数高达30多万,占世界肝癌患者的60%。随着现代医学的发展,确立了肝癌以外科治疗为主的综合治疗原则,然而由于肝细胞肝癌恶性度高、发病隐匿、转移早、复发率高、死亡率高等特点,肝细胞肝癌切除术后5年生存率较低,因此需要我们寻找和肝细胞肝癌发生相关及可以评估肝细胞肝癌切除术后生存的敏感指标,从而更早的、更准确的对肝细胞肝癌进行诊断和肝癌术后患者的预后评估,及时的指导临床医师为患者制定个体化针对性的综合治疗及早期复查方案,进而更好的对肝细胞肝癌的发展进行干预。近期多个研究表明,跨膜丝氨酸蛋白酶(TMPRSSs)的过表达和肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等有关。跨膜丝氨酸蛋白酶,又名Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(TTSPs)是一类定位于细胞膜上具有保守丝氨酸蛋白酶结构域的蛋白家族,TTSPs通过介导细胞间信号转导通路,协调各种细胞功能,调节细胞间信号转导,从而影响肿瘤侵袭和转移。跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)是TTSPs的新家族成员,其在胰腺癌、结肠癌、甲状腺癌和胃癌细胞表面高表达,根据最新研究发现TMPRSSs4是介导癌细胞的入侵、迁移、粘附及上皮间质转化等过程中的一个重要中介,因此,TMPRSS4作为一个癌症潜在诊断和预后标志物被提出来。TMPRSS4是否也能在肝细胞肝癌组织中表达并指导预后,目前该方面的研究较少。在该研究中,我们主要探究TMPRSS4在肝细胞肝癌组织中的表达及其与肝癌术后生存的相关性分析。目的探究跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)在肝细胞肝癌组织中的表达及患者行根治性肝癌切除术后的生存评估,进而提出将TMPRSS4作为肝细胞肝癌发生和发展评估的指标,指导临床诊断、治疗策略和早期干预方案。方法分析由398名肝细胞肝癌并行根治性切除术后患者相关资料及切除肿瘤组织芯片组成的数据库,运用免疫组化的方法评估肝细胞肝癌组织表面和癌旁正常组织表面跨膜丝氨酸蛋白酶4表达情况,并将这些组织芯片根据肝癌细胞表面跨膜丝氨酸蛋白酶4是否高表达将研究对象分为2组：TMPRSS4表达阳性组128人和表达阴性组270人,这两组患者人口统计学资料相似；两组总体发病情况相似；对比这两组患者肿瘤大小、血管侵犯、TNM分期及术后生存情况等,运用统计学方法分析两组之间的差别是否具有统计学意义。结果TMPRSS4蛋白主要在肝癌细胞细胞质或细胞膜表面表达,其颗粒经过免疫组化染色后呈棕黄色或棕褐色。根据肝癌组织和癌旁正常组织进行免疫组织化学染色后给予计算最终的染色强度得分,可见TMPRSS4在肝癌组织中的表达较癌旁正常组织明显上调,组间比较差异有统计学意义(p<0.001)。在TMPRSS4表达情况和肿瘤TNM分期相关性的研究中,398例的研究对象,HCC处于TNM分期Ⅰ-Ⅱ期者352例,处于TNM分期Ⅲ期者46例,TNM分期Ⅰ-Ⅱ期的肝癌组织中TMPRSS4的阳性表达率为29.8%；TNM分期Ⅲ期的肝癌组织中TMPRSS4的阳性表达率为50%。以上结果显示：TMPRSS4蛋白在肝癌Ⅲ期患者中的表达明显高于Ⅰ-Ⅱ期患者(p<0.05)。在TMPRSS4表达情况和肿瘤大小相关性的研究中,肿瘤的大小根据直径是否大于5cm将其分为两组,其中肿瘤大小≤5cm组229例,肿瘤大小>5cm组169例；229例肿瘤大小≤5cm的肝癌组织中TMPRSS4的阳性表达率为27.5%；169例肿瘤大小>5cm的肝癌组织中TMPRSS4的阳性表达率为38.5%。以上结果显示：肿瘤大小>5cm的患者TMPRSS4的阳性率高于肿瘤大小≤5cm患者(p<0.05)。在TMPRSS4表达情况和肿瘤血管侵犯发生相关性的研究中,有血管侵犯的肝癌患者中,TMPRSS4的阳性表达率为40.6%；无血管侵犯的肝癌患者中,TMPRSS4的阳性表达率为29.3%。根据相应数据结果和统计学分析显示：有血管侵犯的患者TMPRSS4的阳性率高于无血管侵犯者(p<0.05),TMPRSS4的高表达和肝癌的血管侵犯相关。运用多变量分析法对可能影响肝癌患者行根治性切除术后生存情况的因素进行分析,分析结果显示TMPRSS4蛋白表达是否阳性这一因素的风险比(HR)为2.20,95%置信区间为1.66-2.90,p<0.001,说明TMPRSS4表达情况可以作为影响肝癌患者行根治性切除术后生存情况的独立危险因素。在TMPRSS4与HCC根治性切除术后生存情况相关性整体分析研究中,所有研究对象中,TMPRSS4表达阳性组的1年总生存率(OS)为82.2%,3年总生存率为50.0%,5年总生存率为34.9%；TMPRSS4表达阴性组的1年总生存率为93.3%,3年总生存率为75.6%,5年总生存率为60.9%,以上数据并结合相关生存曲线,可显示TMPRSS4表达阳性组的总生存率低于TMPRSS4表达阴性组(p<0.001)。TMPRSS4表达阳性组的1年无复发生存率为76.8%,3年无复发生存率为46.4%,5年无复发生存率为37.1%；TMPRSS4表达阴性组的1年无复发生存率为87.9%,3年无复发生存率为69.0%,5年无复发生存率为56.9%,根据数据结合其的生存曲线可显示TMPRSS4表达阳性组的无复发生存率低于TMPRSS4表达阴性组(p<0.001)。在TMPRSS4与HCC根治性切除术后生存情况相关性分层分析研究中,根据患者的肿瘤TNM分期给予分层研究,TNM分期Ⅰ-Ⅱ期者352例,处于TNM分期Ⅲ期者46例,352例的Ⅰ-Ⅱ期的肝癌患者中,TMPRSS4表达阳性组105例,TMPRSS4表达阴性组247例,46例的TNM分期Ⅲ期的肝癌患者中,TMPRSS4表达阳性组23例,TMPRSS4表达阴性组23例,根据随访结果绘制生存曲线,根据结果显示：Ⅰ-Ⅱ期肝癌TMPRSS4表达阳性组5年总生存率为41.7%,Ⅰ-Ⅱ期肝癌TMPRSS4表达阴性组5年总生存率为62.9%,结合生存曲线,Ⅰ-Ⅱ期肝癌患者中TMPRSS4表达阳性组的总生存率低于TMPRSS4表达阴性组(p<0.001)；Ⅰ-Ⅱ期肝癌TMPRSS4表达阳性组5年无复发生存率为40.7%,Ⅰ-Ⅱ期肝癌TMPRSS4表达阴性组5年总生存率为58.0%,结合生存曲线,Ⅰ-Ⅱ期肝癌患者中TMPRSS4表达阳性组的无复发生存率低于TMPRSS4表达阴性组(p<0.001),这样的结果在Ⅲ期肝癌患者中同样出现。结论TMPRSS4在肝癌组织的表达较癌旁正常组织中上调,其的表达水平和肿瘤的大小、肿瘤的TNM分期、是否血管侵犯存在正相关的关系。TMPRSS4表达升高是肝癌患者行切除术后预后不良的因素之一,提示TMPRSS4和肝癌的发生发展存在相关性,有可能作为诊断肝癌指标之一及治疗肝癌的新靶点,TMPRSS4表达阳性的患者尽早给予临床干预和早期随访。