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研究背景高脂血症是一种常见多发病,是引发冠心病、脑卒中等心脑血管疾病的重要危险因素,2012年全国31个省(区、市)范围的调查显示高脂血症患病率大幅度上升,且出现较严重的年轻化趋势,所以减缓高脂血症发病率以及防治继发病成为医学界亟待解决的问题。随着社会发展,人们对治疗方法的要求越来越倾向于既要有疗效又要绿色无毒副作用,艾灸是中医特色疗法之一,其作用颇多,《本草从新》曰:“艾叶苦辛,生温熟热,纯阳之性,能回垂绝之阳,通十二经,走三阴,理气血,逐寒湿,暖子宫……以之灸火,能透诸经而除百病。”现目前已有很多临床研究证实艾灸调脂疗效确切、安全无毒副作用、易操作无痛苦,越来越受到患者的关注和青睐。本研究鉴于艾灸调脂临床疗效确切,故进行相关实验研究。通过对高脂血症病因病机和艾灸作用进行相关文献查阅和临床观察,获知高脂血症的主要病因病机是阳虚气滞、血瘀痰阻,以及艾灸作用具有温补阳气、调畅气机、温化痰瘀、温通血脉等特点,能够很好地针对性治疗高脂血症,所以选择艾灸作为调治高脂血症的方法。然后基于古今医家对影响灸效的相关因素(灸感和灸量)的认识,以及对相关现代研究的盘点获知有关灸感方面的研究(尤其是不同灸温)很多,但灸量相关的研究并不多,而且现有研究多集中在不同灸时方面的比较,对于单位时间燃烧艾草多少(即不同灸疗面积以及单位时间燃烧速度)相关研究几乎没有;然后本课题还从古典文献中寻找相关理论依据,如孙思邈《备急千金要方》中讲“外气务生,内气务熟”,强调病在体外浅表部,灸量宜少,病在内则灸量宜大,以及“头面目咽,灸之最欲生少……胸背腹灸之,尤宜大熟……腹藏之内,为性贪于五味,无厌成疾,风寒结痼,水谷不消,宜当熟之。”以及《针灸资生经·艾炷大小》中也说:“如腹内病,瘾瘩癖块伏梁气等,惟须大艾炷。”获知像高脂血症这种慢性代谢性疾病属病在内脏,故宜采用人灸量熟灸,且施灸部位宜取腹部;再加上由于腹部是循行肝脾肾三经及任脉所在,肝、脾、肾是高脂血症的主要相关脏腑,为本实验取以神阙穴为中心的腹部大灸量治疗高脂血症提供一定的理论依据;在诸多艾灸调脂的实验研究中,选用的穴位多是神阙穴由此本课题取不同灸量(即单纯的神阙穴灸疗和以神阙穴为中心的腹部的大灸量灸疗)作为本研究的不同干预因素。最后对于观察指标的选择,本研究通过对艾灸调脂相关实验研究的综合查阅,获知目前有关艾灸调脂机制及其防治的动脉粥样硬化(AS)机制的研究除了探究调节脂代谢的相关蛋白(观察血清apoA、apoB含量与脂蛋白代谢酶(LPL和HL活性)、保护血管内皮结构(电镜观察主动脉内皮细胞超微结构)、保护血管内皮功能(观察指标为血清ET-1、NO含量)、抗氧化作用(观察血清OX-LDL、LPO、SOD、GSH-px含量)、抗炎症作用(观察血清IL-6、IL-8、TNF-a等含量)以及调节相关受体表达(观察CGRP、背根神经节瞬时感受器电位香草酸受体lmRNA表达、施灸处皮肤缝隙连接蛋白43表达)等途径之外,其他方面的研究极少;在文献查阅中还了解到apoA-1/ABCA1通路促进胆固醇逆转运(RCT)中的重要途径之一,通路开发时细胞内多余的胆固醇外流,然后由HDL中apoA-1携带转运至肝脏降解。虽然现有研究在一定程度上很好的阐述了艾灸调脂以及保护血管的可能机制,但并不是很全面,故本实验从不同灸量入手,观察探究艾灸在调脂方面的作用,以及从apoA-1/ABCA1胆固醇逆转运路径探究艾灸保护血管的可能作用机制。研究目的观察比较不同灸量下高脂血症小鼠模型的血脂水平、内皮功能以及apoA-1/ABCA1胆固醇逆转运通路的影响,探究艾灸发挥调脂、防治AS作用的可能机制。研究方法选用2月SPF级龄雄性C57BL6小鼠40只,适应性喂养7天后,随机分为空白正常对照组(CON组)、高脂血症模型组(MOD组)、神阙穴灸疗组(T1组)和以神阙穴为中心的腹部灸疗组(T2组),每组10只,称量并记录造模前每组小鼠的体重,在整个造模和实验过程中除CON组基础饲料正常饮食外,其余3组均高脂饲料饮食,饲养30天后,分别进行以下干预:T1组固定小鼠,用陈年艾草线香(直径2mm)悬灸于神阙穴正上方,离皮距离约(5±1)mm,每5s弹一次灰;T2组固定小鼠,艾草制的艾条(直径20mm)垂直悬于神阙穴正上方(20土5)mm处,每5s弹一次灰。T1组和T2组艾灸过程中均每隔1min用接触式测温仪监测一次神阙穴皮区温度,上下调节艾灸离皮距离将灸温控制在43-45℃,每次灸1Omin,1次/日,共灸30天,这期间饮食仍旧高脂饲料。CON组和MOD组:两组分别进行基础饲料和高脂饲料喂养,每天都常规固定1Omin,其他不做处理,1次/日,干预30天后称量并记录每组小鼠的体重以及取小鼠血清和新鲜胸主动脉。分别进行血清检测TG、TC、HDL-C、LDL-C、apoA-1、ET-1、NO和胸主动脉western Blot检测ABCA1蛋白表达含量。研究结果1.造模前各组间体重差异无统计学意义(P>0.05)。干预结束后MOD组同CON组相比体重显著增加(P<0.05);T1组与T2组分别同MOD组相比,体重均有不同程度的显著降低(P<0.05),其中尤以T2组最为显著。2.MOD组与CON组相比,血清TG、TC、LDL-C和HDL-C含量均显著升高(P<0.05)。实验结束后,T1组、T2组分别同MOD组比较,T1组血清TG、TC、LDL-C和HDL-C含量虽均有降低,但无统计学意义(P>0.05);T2组血清TG、TC和HDL-C含量均有显著降低(P<0.05),除此之外LDL-C虽也有降低,但无统计学意义(P>0.05)。3.实验结束后,MOD组经过高脂饮食喂养后与CON组相比血清apoA-1含量显著升高(P<0.05);T1组、T2组分别与MOD组相比,两组血清apoA-1含量均降低,但无统计学意义(P>0.05);T1组血清apoA-1含量显著高于CON组(P<0.05),T2组与CON组相比,apoA-1水平虽稍高于CON组,但无统计学意义(P>0.05)。4.MOD组与CON组相比,血清一氧化氮(NO)含量略微升高,但无统计学意义(P>0.05);T1组、T2组分别同MOD组比较,两组NO含量均依次提高,亦无统计学意义(P>0.05)。MOD组和CON组相比,血清内皮素-1(ET-1)含量显著升高(P<0.05);T1组、T2组分别与MOD组比较,ET-1含量均有显著下降(P<0.05),以T2组最为显著。5.使用软件对western Blot检测出的条带图片进行扫描得到灰度值,灰度值统计结果有MOD组同CON组相比,小鼠胸主动脉ABCA1的表达水平显著降低(P<0.05);不同干预后,T1组、T2组分别与MOD组比较,两组ABCA1的表达水平均有不同程度的显著升高(P<0.05),以T2组最为显著。研究结论1.高脂饮食能够使体重迅速增加,艾灸疗法能很好地减缓此体重增加的速度。2.以神阙穴为中心的腹部大灸量艾灸在调脂、促进胆固醇逆转运以及保护血管内皮功能方面较单纯的神阙穴灸效果好。3.艾灸调脂机制可能与介导胆固醇逆转运的apoA-1/ABCA1通路有关。