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AP2族转录因子在植物中以多基因家族的形式存在,在植物适应逆境的过程中起着重要的调节作用并具有明显的功能多样性。为了开展AP2族转录因子在辣椒逆境胁迫响应中的功能分析,本研究利用UV诱导处理的辣椒叶片所构建的cDNA文库,在优化cDNA文库筛选方法的基础上,筛选出2个AP2(APETALA2)转录因子的全长cDNA,另外还利用文库为底物进行PCR扩增获得两个AP2转录因子cDNA部分片段。初步研究了上述cDNA在SA(salicylic acid)、ABA(abscisic acid)、ET(ethylene)、JA(jasmonic acid)等外源信号物质作用下的转录表达,主要结果如下: 1、采用基于PCR技术的96孔板cDNA文库筛选法,利用含有AP2转录因子基因高度保守序列设计的引物,筛选cDNA文库获得了2个全长的AP2转录因子的阳性cDNA克隆CaAP21、CaAP22以及另外两个AP2转录因子的cDNA片段。测序结果表明,CaAP21的长度为745bp,含有编码长度为229个氨基酸的开放读码框架;CaAP22长度为900bp,含有长度为155个氨基酸的开放读码框架,CaAP23长度为423bp,CaAP24长度为467bp,上述四个cDNA的翻译氨基酸序列均含有保守的AP2域。同源分析结果表明,所分离的cDNA与已发表的AP2转录因子具有不同程度的同源性,其中CaAP21与辣椒乙烯响应元件结合蛋白(AAX20037)的同源性为79.41%,与烟草乙烯响应元件结合蛋白(BAA07323)的同源性为54.39%,与番茄乙烯响应因子(AAS72389)的同源性为53.36%,与烟草乙烯响应元件结合蛋白(BAA97124)的同源性为51.39%:CaAP22与拟南芥乙烯响应元件结合蛋白(AAT44928)的同源性为38.03%,与籼稻乙烯响应元件结合蛋白(CAE05154)的同源性为31.23%,与拟南芥乙烯响应元件结合蛋白(AAT44952)的同源性为29.43%,与拟南芥乙烯响应元件结合蛋白(BAB08875)的同源性为29.03%。但是CaAP21、CaAP22、CaAP23、CaAP24彼此之间的除了AP2域外,同源性很低,推测上述cDNA均为辣椒AP2家族不同成员的cDNA。 2、以辣椒为研究材料,用一定浓度的外源ABA、SA、ET、JA分别处理辣椒幼苗的叶片,于不同时间段提取总RNA进行一步法反转录半定量RT-PCR。结果发现CaAP21受ABA抑制,受SA和ET激活,不受JA的影响;CaAP22受ABA、SA的激活,不受ET处理的影响,推测CaAP21可能与SA或ET介导的植物抗病反应有关,而CaAP22则可能与ABA、SA介导的植物抗病或干旱、盐胁迫、低温等非生物胁迫