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目的:观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)患者血清诱导的人Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,ATⅡ细胞)间隙连接蛋白Connexin43(Cx43)及其mRNA表达的变化;研究连续性血液净化(continuous blood purification,CBP)对其表达Cx43及其mRNA的影响和可能机制。方法:①分别用健康志愿者清晨空腹血清及重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)伴ALI患者行CBP治疗前、治疗6 h、治疗20 h时的血清于体外诱导培养人ATⅡ细胞(A549细胞)48 h,采用免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测四组细胞Cx43及其mRNA的表达;②采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测健康志愿者清晨空腹血清及患者CBP治疗不同时间点血清的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,探讨其与该血清诱导的ATⅡ细胞Cx43 mRNA表达的相关性。结果:①倒置显微镜显示患者CBP治疗前血清诱导的ATⅡ细胞生长缓慢,呈衰老征象;免疫荧光法及RT-PCR显示ALI患者行CBP治疗前的血清诱导的ATⅡ细胞Cx43及其mRNA的表达明显少于健康对照组(P<0.01);②倒置显微镜显示随患者行CBP治疗时间的延长,患者血清诱导的ATⅡ细胞生长逐渐加快,形态逐渐恢复至接近健康对照组。免疫荧光法及RT-PCR显示CBP治疗6 h及20 h时患者血清诱导的ATⅡ细胞Cx43及其mRNA的表达明显多于治疗前组(P<0.01);CBP治疗20 h时患者血清诱导的ATⅡ细胞Cx43 mRNA的表达明显多于治疗6 h组(P<0.01);③ELISA显示CBP治疗前后患者各时间点血清TNF-α水平均高于健康对照组,CBP治疗6 h及20 h时患者血清TNF-α水平明显低于治疗前组(P<0.01);CBP治疗20 h时患者血清TNF-α水平明显低于治疗6 h组(P<0.01);患者血清TNF-α水平与其诱导的ATⅡ细胞Cx43 mRNA的表达呈直线负相关(r=-0.91,P<0.01)。结论:①ALI患者血清可使ATⅡ细胞Cx43及其mRNA的表达减少;②CBP治疗可增加ALI患者血清诱导的ATⅡ细胞Cx43及其mRNA的表达;③CBP治疗有效清除血清TNF-α可能是其增加ALI患者血清诱导的ATⅡ细胞Cx43及其mRNA表达的重要机制之一。