肝脏在切除或受损时能够增生的现象叫作肝再生。大鼠肝70%切除模型是最接近生理状况下肝再生的动物模型,也是一种研究细胞周期调控和生理性血管生成的成熟模型,被广泛应用。肝脏作为一种由十多种细胞构成的复杂器官,肝脏结构及其功能的恢复要依赖各种肝脏细胞体积和数量的增加,以及不同肝脏细胞或同种细胞间的相互作用。作为组成肝脏的主要非实质细胞,肝血窦内皮细胞(Liver sinusoidal endothelial cells, LSEC)在肝再生过程中起重要作用。70%肝脏切除后,再生肝细胞首先形成无血管的肝细胞岛,只有当肝窦内皮细胞增殖形成肝窦结构后,再生的肝细胞岛才逐渐具有了正常的组织结构。再生时期基因表达主要在量上发生变化,而不是出现新的基因表达,很难从基因的层次说明肝脏再生的整体变化,而蛋白质组学研究具有大规模、高通量、高灵敏度的特点,故用从整体上研究肝再生较为合适。鉴于肝窦内皮细胞在肝再生中的重要作用以及亚细胞蛋白质组学的优势,本实验以肝再生过程中肝窦内皮细胞膜蛋白在手术组(PHx)和假手术组(SHam)中的比较蛋白质组学为研究对象,深入探讨肝再生的机理及其血管生成的机制。运用阳离子胶体硅灌注结合蔗糖密度梯度离心分别提取手术组(PHx)和假手术组(SHam)72h后再生肝脏的肝窦内皮细胞质膜,然后将提取到的质膜用裂解液裂解后进行SDS-PAGE电泳,酶解,质谱分析鉴定。共鉴定到74个蛋白质在两组肝再生模型中的表达量有显著差异,相对于假手术组(SHam),47种蛋白质的表达量在70%肝切除72h后的再生肝脏中上调,27种蛋白质的表达量下调。通过生物信息学整理与分析,所鉴定到的74个差异表达蛋白质,分别参与了细胞的分裂增殖与凋亡、细胞周期的调控、细胞的运动、血管生成、细胞分化、代谢及炎症反应。蛋白质的糖基化修饰是最重要和最普遍的蛋白质翻译后修饰之一,在生物体内起着极为重要的作用,糖蛋白质的量、糖基化位点的改变以及糖链结构的改变等都直接或间接的影响着细胞生命活动的进行。因此,研究肝再生过程中蛋白质的糖基化修饰及其变化具有非常重要的意义。本实验对手术组(PHx)和假手术组(SHam) 72h后再生肝脏中的肝窦内皮细胞质膜分别在相同条件下进行溶液酶解,然后运用凝集素亲和法分离富集糖蛋白,最后进行质谱鉴定分析。在手术组(PHx)中鉴定到40个糖肽,对应于30个糖蛋白,共有42个糖基化位点；在假手术组(Sham)中共鉴定到35个糖肽,对应于27个糖蛋白,共有35个糖基化位点。并发现有5个肽段在PHx和Sham两组中均被鉴定到,但它们相应的糖基化修饰却发生了变化,相信这一重要发现会对我们更好的探讨与研究肝脏再生功能提供重要的理论依据。