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淀粉是反刍动物主要的能量来源之一,高产反刍动物日粮含大量淀粉以满足其能量需要。淀粉在小肠能量利用率比瘤胃高42%。然而反刍动物小肠淀粉利用率低,过量淀粉不但造成能量损失,同时威胁动物健康。因此,提高小肠淀粉利用率对反刍动物生产有重要意义。胰腺α-淀粉酶分泌不足限制反刍动物小肠淀粉利用率的关键因素之一。亮氨酸不但是蛋白质合成底物,也是调控蛋白质合成的重要营养因子,可能影响反刍动物胰腺酶分泌。鲜有亮氨酸调控奶牛胰腺外分泌功能报道。本试验旨在研究十二指肠灌注亮氨酸对奶牛胰腺外分泌功能及血浆指标的影响,为提高奶牛小肠淀粉消化率提供理论依据。试验一一种实时监测奶牛胰腺外分泌功能的方法选用健康的周岁中国荷斯坦奶牛(215±7kg),运用十二指肠肠袋创建手术、肠吻合手术及十二指肠插管手术等多种技术,结合胰液体外引流技术建立实时监测奶牛胰腺外分泌功能变化的方法。结果表明,该手术方法成功率较高,节省人力物力,能够对奶牛活体实时监测胰腺外分泌功能。试验二奶牛胰液分泌速率的测定选用4头健康无病、体况相近,手术安装十二指肠瘘管(灌注管和回流管),体内创建十二指肠胰液收集袋的周岁荷斯坦母牛(215±7kg)为试验动物,24h连续监测胰液分泌量,测定奶牛胰液分泌速率。结果表明,本试验条件下奶牛胰液平均分泌速率为111.95±8.96mL/h(0.52mL·kg-1·h-1)。对饲喂时间点和奶牛胰液分泌量相关分析发现,饲喂能够显著刺激胰液分泌(P<0.05)。试验三十二指肠灌注亮氨酸对奶牛胰腺外分泌功能及相关血液指标的影响采用4×4拉丁方试验设计,选用4头健康无病、体况相近,手术安装术安装十二指肠瘘管(灌注管和回流管),体内创建十二指肠胰液收集袋的周岁荷斯坦母牛(215±7kg)为试验动物,进行十二指肠亮氨酸灌注试验(灌注水平为0、10、20和30),每期灌注12h,连续采样36h,研究不同亮氨酸灌注水平对奶牛胰腺外分泌功能及血液指标的影响。结果表明,不同亮氨酸灌注量不影响胰液分泌速率(mL/h)、胰液pH、胰液蛋白含量(mg/mL)及蛋白分泌速率(mg/h)。各处理组间胰蛋白酶活性、糜蛋白酶分泌浓度(U/mg)、旨肪酶分泌浓度(U/mL)及合成速率(U/h)差异不显著。十二指肠灌注亮氨酸显著影响糜蛋白酶分泌浓度(U/L)和合成速率(U/h),呈三次曲线变化(P<0.01);胰腺α-淀粉酶分泌浓度(U/L和U/mg)、合成速率(U/h)及脂肪酶分泌浓度(U/mg)随着亮氨酸灌注量增加呈现先升高后下降再升高趋势(P<0.001)。当亮氨酸灌注量为10g时,胰腺α-淀粉酶合成速率(U/h)最大。十二指肠灌注亮氨酸不同处理间血浆葡萄糖差异不显著,而血浆CCK含量和胰岛素含量线性增加(P<0.01)。36h监测奶牛胰腺α-淀粉酶合成速率(U/h)结果表明,1-12h亮氨酸灌注组(10,20和30g)胰腺α-淀粉酶合成速率均高于对照组;13-24h,所有处理组胰腺α-淀粉酶合成速率差异不显著;25-36h,灌注20g亮氨酸组α-淀粉酶合成速率显著低于0和10g灌注组。本研究建立了一种实时监测奶牛胰腺外分泌功能方法,并发现饲喂刺激奶牛胰液分泌;十二指肠灌注亮氨酸可能通过刺激胰岛素或CCK分泌调控奶牛胰腺外分泌共功能,但其作用受血液氨基酸含量影响。