棘白菌素B高产菌株的选育及其发酵与提取工艺优化

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阿尼芬净在抗真菌药物市场的价值越来越大,国内许多制药公司正在仿制该药物。棘白菌素B是合成阿尼芬净药物的关键中间体,其生产成本严重影响仿制药阿尼芬净的制造成本及市场竞争力,十分有必要对其生产菌株及制备工艺进一步优化研究。本论文在实验室前期研究的基础上,对棘白菌素B的产生菌进一步选育,并优化选育获得高产菌株的发酵、提取与纯化工艺。以实验室保藏的菌株SIPI-MT2为出发菌株,经过紫外(UV)、亚硝基胍(NTG)等多种诱变方法诱变和筛选,获得一株较为稳定的高产菌株SIPI-W15,其发酵产物棘白菌素B效价较出发菌株提高了49.4%。对SIPI-W15菌株的摇瓶发酵工艺进行了优化研究,通过单因素实验考察了不同发酵培养基成分及含量对发酵效价的影响,在此基础上利用响应面设计实验获得最佳发酵培养基,并优化了培养条件。在优化后的发酵工艺条件下,发酵效价较原始工艺提高了55%,摇瓶发酵棘白菌素B的产量达到了2013μg/ml。对棘白菌素B提取工艺进行优化,确定丙酮为提取最佳溶剂及SP825型号大孔吸附树脂为提取树脂,完善整个提取纯化工艺路线,制备获得化合物棘白菌素B样品,纯度达到95.3%。
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