骨肉瘤是一种高度恶性的原发骨肿瘤，主要发生于儿童与青少年，常见发生部位在股骨远端与胫骨近端，目前标准的治疗方案是新辅助化疗结合手术治疗，尽管新辅助化疗的应用提高了5年生存率，但是复发病例及有肺部微转移的患者预后不良。而且近30年来在抗骨肉瘤方面没有获得实质性的进展，传统化疗药物严重的毒副作用与其多药耐药（multidrug resistance MDR），使一部分患者获益很少。所以，疗效更好，毒副作用更小的抗骨肉瘤新药急需开发。二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)，又称“脑黄金”,属于ω-3系列长链多不饱和脂肪酸（ω-3PUFA），在人体中必需但体内又不能合成,但在深海鱼类和海洋微藻类植物中含量丰富。二十二碳六烯酸具有多种生物活性，例如：抗炎，免疫调节，预防动脉硬化等作用，而近些年的研究侧重于其在抗肿瘤方面的作用。有研究报道发现DHA对子宫癌，乳腺癌，结肠癌和前列腺癌等有抑制作用[1-3]。而DHA对人骨肉瘤细胞株的作用以及相关机制未见报道，本研究以人骨肉瘤细胞株MG-63为研究对象，探讨DHA对人骨肉瘤细胞株增殖的影响。目的：研究DHA对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖的影响及可能的分子机制。方法：实验取对数生长期的人骨肉瘤细胞MG-63，用MTT法检测不同浓度DHA（20ug/ml，40ug/ml，60ug/ml DHA试验组，对照组，溶媒对照组）分别处理细胞24h，48h，72h后，统计DHA对细胞的增殖抑制作用。并用倒置显微镜观察不同DHA浓度对MG-63细胞形态学的影响。采用流式细胞仪分析不同浓度DHA处理下的各期细胞比率和细胞凋亡率。用RT-PCR技术检测不同浓度药物处理MG-63细胞48h后，其细胞内BCL-2和Caspase-3mRNA含量的变化。用Western Blot法检测不同浓度药物处理MG-63细胞48h后，其细胞内BCL-2，Caspase-3蛋白表达情况。结果：1.形态学结果：倒置显微镜下未处理组可见细胞呈纺锤形，多边形，体积大，结构清晰，胞质透亮，贴壁牢固。药物处理组可见细胞突起消失，有的呈长梭形，细胞逐渐变圆，变小，有的细胞悬浮于培养基中。2.MTT结果：DHA能明显抑制MG-63细胞的生长，且呈时间和浓度依赖性，与对照组相比，差异具有显著统计学意义(P<0.01)。3.碘化丙啶染色法流式检测结果：随着DHA药物浓度的提高，MG-63细胞凋亡率也提高，呈明显浓度依赖性，0ug/ml，20ug/ml，40ug/ml，60ug/ml的DHA处理48h后，其凋亡率分别为(2.41±3.72)%，(7.34±4.44)%，(16.93±5.32)%，(27.37±5.53)%。40ug/ml和60ug/ml浓度组与对照组相比，差异具有显著统计学意义(P<0.01)。细胞周期检测结果：DHA能改变MG-63细胞的周期分布，随浓度的提高，S期细胞比例降低， G1期细胞比例提高。4.RT-PCR结果：DHA处理MG-63细胞后可降低BCL-2的mRNA的转录水平，提高Caspase-3的mRNA的转录水平。5.免疫蛋白印迹检测表明：随着DHA剂量的增加，MG-63细胞中BCL-2的表达逐渐降低，Caspase-3的表达逐渐增加。结论：1.DHA可呈时间和浓度依赖性抑制人骨肉瘤细胞MG-63的生长，并使细胞周期阻滞于G1期。2.DHA能诱导人骨肉瘤细胞MG-63发生凋亡，可能是通过线粒体凋亡途径实现的。