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金纳米材料具有易制备、低毒、良好的生物兼容性、高效的导电和催化性能等诸多优点而被广泛应用于生物传感器,光学检测,电化学等各种分析检测领域中。特别是稳定、快捷、简便、安全无毒的金纳米标记及检测方法已经引起了国内外研究者的广泛关注。目前,与人类生活密切相关抗胆碱酯酶药物包含:农业除虫的有机磷农药,治疗阿尔兹海默症的相关药物以及在恐怖活动中出现的化学神经毒剂等。这些药物都能与生物体内的乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性位点结合,从而抑制酶的活性,阻碍生物体内神经递质的传递。而某些肟类解毒剂能与磷酸化的乙酰胆碱酯酶(OP-AChE)结合,从而释放AChE;恢复其活性。不管是抗胆碱酯酶药物还是解毒剂与AChE的活性都有一定的线性相关性。在本论文中,基于AChE能作为一个良好的生物标志物来实现对影响AChE活性药物暴露的监测。我们将采用一些更简单,更可靠的方法来实现对AChE活性的高灵敏的检测。基于上述设计思想,本文主要的研究内容概括如下:(1)作为复活剂的含肟官能团的某些化合物能有效的作用于OP-AChE,使其重新恢复酶的催化活性。肟类复活效果与恢复的AChE的活性呈一定线性关系,因此我们构建了一个基于石墨烯-金纳米-壳聚糖复合材料修饰的乙酰胆碱酯酶的生物传感器,在同一种农药—乙基对氧磷的相同抑制条件下,用来检测三种不同肟类复活剂的复活效果,这种新的电化学方法用来进一步探讨药物药效与其化学结构之间的密切联系。希望对以后研究新的解毒剂的治疗效果提供一定的理论基础。(2)我们提供了一个高灵敏,双向检测(比色和荧光)胆碱酯酶药物的药效的方法。检测的机理如下:L-苯丙氨酸(L-Phe)与AuNPs通过静电作用形成L-Phe-AuNPs复合物,形成的L-Phe-AuNPs溶液任保持红色而L-Phe的荧光被AuNPs粹灭。当加入AChE和ATCL后,AChE能催化分解ATCL产生硫代胆碱。硫代胆碱与AuNPS形成S-Au键,使硫代胆碱比L-Phe更能强烈的吸附在AuNPs表面。从而使L-Phe从AuNPs表面脱落,恢复其荧光。而AuNPs表面的硫代胆碱和剩余的L-Phe通过静电作用相互结合,促使AuNPs的团聚。从而使AuNPs的颜色从红色变为蓝色。颜色和荧光强度双向检测信号的同时输出可以用来避免实验室中阳性信号。很明显,AuNPs的团聚以及L-Phe荧光恢复程度都依赖于体系中AChE活性。而胆碱酯酶药物的暴露与AChE的活性呈一定的线性关系。这个研究提供了一个高灵敏和高选择性的L-Phe修饰金纳米材料的双检测(比色和荧光)对胆碱酯酶药物的筛选。