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多糖具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、调节免疫和抗氧化等生物活性,存在于动物、植物和微生物中。作为生理活性物质的黑木耳多糖,近年来日益受到人们的重视。铬是人体必需的微量元素,也是胰岛素发挥降糖作用的必需元素。三价铬是葡萄糖耐受因子(GTF)的有效活性成分,具有改善糖尿病病人糖代谢的作用。本课题有效的将二者结合在一起,进一步做辅助降血糖功能的研究。旨在促进黑木耳及其多糖资源的深度开发利用。具体研究结果如下：1、通过建立体外α-葡萄糖苷酶抑制剂微孔筛选模型,研究了不同提取物的黑木耳多糖对α-葡萄糖苷酶体外抑制作用以及其不同醇沉片段对该酶的抑制作用。不同黑木耳多糖提取物与其不同的醇沉片段对α-葡萄糖苷酶的活性均表现出一定的抑制作用,且其作用大小与浓度呈明显的剂量-效应关系。黑木耳多糖有抑制α-葡萄糖苷酶的作用,三种不同的黑木耳多糖样品中,黑木耳酸性多糖的抑酶活性最强,黑木耳中性多糖次之,黑木耳碱性多糖最弱。不同黑木耳酸性多糖醇沉片段中,80%醇沉片段的抑酶活性最强。NaCl洗脱的不同片段中,0.2mol/LNaCl洗脱的多糖片段对α-葡萄糖苷酶活性的抑制最好。由此可以得出：0.2mol/LNaCl洗脱的黑木耳酸性多糖片段为体外抑制α-葡萄糖苷酶活性的优势样品,并设为AAP。2、因为硫酸酯化黑木耳酸性多糖具有较好的生物活性,并且其更容易被人体吸收,所以运用响应面法对黑木耳酸性多糖的最佳硫酸酯化工艺条件进行优化研究。研究了氯磺酸与N-N二甲基甲酰胺的体积比、酯化试剂的体积含量、反应温度、反应时间、转速5个因素对黑木耳多糖硫酸酯化取代度的影响。利用最陡爬坡试验逼近因素的最大响应区域,采用Box-Behnken设计法对各因素的水平组合进行优化,获得黑木耳酸性多糖硫酸酯化优化条件：氯磺酸：N-N二甲基甲酰胺为1：3.49、酯化试剂比例为33%、反应温度50℃、反应时间112.84min、转速为200r/min。在此优化条件下硫酸酯化黑木耳酸性多糖的取代度可达0.4905。红外光谱解析SAP在1259 cm-1(S=O)和799cm-1(C-O-S)处有-OS03的S=O伸缩振动和C-O-SO3基团的伸缩振动特征吸收峰,说明合成产物SAP有硫酯键。3、采用分光光度法考察硫酸酯化黑木耳酸性多糖与三价铬的质量比、螯合时间、螯合温度、pH值、三价铬的初始浓度5个因素对其螯合率的影响,利用最陡爬坡试验逼近因素的最大响应区域,采用Box-Behnken设计法对各因素的水平组合进行优化,获得硫酸酯化黑木耳酸性多糖与三价铬螯合的优化条件：SAP与Cr(Ⅲ)的质量比为3.68：1,螯合温度为55.72℃,螯合时间为3h、Cr(Ⅲ)的初始浓度为5.77mg/mL,pH值为5。在该条件下螯合率为24.00%。应用响应面法所得到的硫酸酯化黑木耳酸性多糖-铬(Ⅲ)螯合物的合成工艺参数是可行的。红外图谱显示,三价铬已经螯合到SAP上,形成了SAP-Cr螯合物。同时为黑木耳多糖与三价铬螯合物的进一步开发利用提供参考。4、以四氧嘧啶诱导建立糖尿病小鼠模型,通过黑木耳酸性多糖与硫酸酯化黑木耳酸性多糖与三价铬螯合物的治疗,比较治疗前后小鼠体质量及空腹血糖的变化、测定治疗后关键酶己糖激酶、琥珀酸脱氢酶的活性,研究黑木耳酸性多糖对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。动物结果表明：体内降血糖效果发现,黑木耳酸性多糖与硫酸酯化黑木耳酸性多糖与三价铬螯合物可减缓糖尿病小鼠体质量的负增长；缓解己糖激酶、琥珀酸脱氢酶的降低。AAP和SAP-Cr对降低空腹血糖试验结果均为阳性,有辅助治疗糖尿病的作用。结果表明,与糖尿病模型组比较,AAP和SAP-Cr具有明显的降血糖作用。