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随着社会的发展进步和内镜技术的飞速发展,经自然腔道内镜手术(Natural Orifice Transluminal Endoscopic Surgery,NOTES)自2004年问世以来,就以其创新的设计理念和潜在的替代传统手术以及腹腔镜手术的应用前景,吸引了腹腔镜外科医师和消化内镜医师的极大兴趣,成为目前微创发展的研究重点和热点之一。由于消化内镜技术的发展,以腹腔为手术目标区域的NOTES手术,相比较经阴道入路、经肛结直肠入路、经尿道膀胱入路等入路,经胃自然腔道内镜手术(Transgastric Natural Orifice Transluminal Endoscopic Surgery,TG-NOTES)具有较多优势,而获得更多研究和关注,其中最引人注目的是采用不关闭黏膜切口内镜下黏膜剥离技术(Endoscopic Submucosal Dissection Without Mucosal Closure,ESDWMC)进行的经胃自然腔道内镜手术。但不关闭黏膜切口的经胃自然腔道内镜手术(Without Mucosal Closure Transgastric Natural Orifice Transluminal Endoscopic Surgery With Endoscopic Submucosal Dissection,WTG-NOTES)能否解决自然腔道切口闭合和细菌感染等两个主要问题,是WTG-NOTES技术能否在临床上替代传统手术甚至腹腔镜手术的关键。本研究旨在通过动物实验研究,评估WTG-NOTES手术的安全性和可行性,根据外科无菌术原则评估WTG-NOTES的感染预防方法,对比传统腹腔镜手术围手术期对实验动物创伤应激指标的影响,评估WTG-NOTES对机体创伤应激的影响,为WTG-NOTES在临床的应用,提过理论依据和实践经验。方法:选取本地母猪40只,体重35kg,对实验动物进行气管插管全身麻醉,采用wtg-notes技术或传统的腹腔镜技术进行腹腔探查,麻醉清醒后立即喂食液体食物,术后第二天恢复常规饮食。研究由三个部分组成,实验一选用8只本地母猪,先采用wtg-notes技术进行腹腔探查,记录手术时并发症情况,探查结束时立即改为传统腹腔镜技术进行腹腔探查,观察wtg-notes技术造成的浆膜层切口的情况,记录气腹压力数值,观察充气试验后的气腹压力数值,观察充水试验后浆膜层切口有无液体溢出;实验二,选用16只本地母猪,按照随机原则分为实验组和对照组,每组8只动物,实验组麻醉后即刻静脉应用抗生素,术后继续静脉应用抗生素48小时,麻醉后联合应用生理盐水、络合碘消毒剂、抗生素清洁实验动物的面部、口腔、食道和胃腔,对照组单纯静脉应用抗生素,两组动物均采用wtg-notes技术行腹腔探查,抽取术前、术后胃液、腹腔冲洗液,即刻送细菌培养,进行细菌菌落数观察记录、菌种鉴定;实验三,用16只本地母猪,按照随机原则分为实验组和对照组,每组8只动物,均按照实验二中实验组方法进行感染预防控制,一组采用wtg-notes行腹腔探查(内镜组),一组采用传统腹腔镜技术行腹腔探查(腔镜组),分别在麻醉诱导前、手术结束时、手术结束后24小时、手术结束后48小时、手术结束后72小时、手术结束后7天抽取静脉血,检测白细胞(wbc)、皮质醇(cort)、c-反应蛋白(crp)、肿瘤坏死因子-α(tnf-α),对比创伤应激指标。结果:实验一:8只本地猪均成功通过wtg-notes技术完成腹腔探查,无严重并发症发生,腹腔镜腹腔探查未发现活动性浆膜层切口出血,充气实验后气腹压力较之前增加0.8±1.1mmhg,差异无统计学意义(p>0.05),充水实验后未发现泄露;实验二:实验组和对照组术前胃液细菌菌落数对比(28300±17000cfu/mlvs25600±19100cfu/ml),差异无统计学意义(p>0.05),菌种鉴定以大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯杆菌为主,实验组术后胃液和腹腔冲洗液均未培养出细菌,对照组中有4只动物(50%)术后胃液培养出细菌,与术前胃液细菌菌落数对比(14500±11800cfu/mlvs25600±19100cfu/ml),差异有统计学意义(p<0.05),与实验组对比(4/8vs0/8),差异有统计学意义(p<0.05),对照组有1只动物(12.5%)腹腔冲洗液培养出细菌,与实验组对比,差异无统计学意义(p>0.05);实验三:在六个检测时间点,两组实验动物的crp、tnf-α含量比较,差异无统计学意义(p>0.05),wbc在术后24h及72h经胃入路notes组较腹腔镜技术组白细胞升高(15.36±2.62比13.2±2.73,18.84±6.41比16.80±5.02),差异有统计学意义(P<0.05),在其余4个检测时间点两组差异无统计学意义;CORT在手术结束时经胃入路NOTES组较腹腔镜技术组升高(29.72±10.3比21.74±8.7),差异有统计学意义(P<0.05),在其余5个检测时间点,两组差异无统计学意义(P>0.05)。。结论:1,不关闭黏膜切口的经胃自然腔道内镜手术(WTG-NOTES)可短时间内自行关闭自然腔道手术造成的切口和隧道,安全可行;2,WTG-NOTES采用静脉应用抗生素联合局部消毒,是有效降低腹腔感染的有效办法,WTG-NOTES需根据外科无菌术原则,参考外科胃肠道手术术前准备和外科手术无菌操作,进行感染预防控制;3,与腹腔镜手术相比,WTG-NOTES并不增加围手术期实验动物创伤应激因子含量,不增加对实验动物的创伤应激。NOTES作为一项新技术,尽管目前的发展受到诸多限制,但仍值得进一步研究。