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目的钾离子通道广泛存在于各种组织的细胞膜表面,在维持细胞膜电压、细胞内pH值及细胞容积调节等方面发挥着重要的作用。另外,钾离子通道与细胞的增殖有关,在多种肿瘤细胞中大量表达。GIRK属于内向整流型钾离子通道,存在5种不同类型的亚单位:GIRK1-5。本研究通过RT-PCR技术检测宫颈活体组织中GIRK1、2 mRNA的表达水平,探求GIRK1、2 mRNA与宫颈癌变的关系及放化疗对GIRK1、2的影响。材料与方法一、实验材料1、标本取自中国医科大学附属第一医院妇科2005年6月至2007年9月宫颈活检及术前未经治疗手术切除之标本,经病理证实的宫颈癌标本70例,其中10例经放化疗2周后再次取材,另取同期我科因子宫肌瘤行子宫切除术,术后经病理证实的正常宫颈组织标本10例。收集宫颈癌患者的临床病理资料进行统计学分析,包括:病理分级、临床分期、年龄、治疗前后。2、试剂RNAiso Reagent(Toral RNA提取试剂),TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver3.0,GIRK1、GIRK2、β-actin上游及下游特异性引物,琼脂糖凝胶电泳所需试剂。二、实验方法RT-PCR技术三、结果判定GIRK1、GIRK2 mRNA通过PCR仪扩增后,行琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果,并通过测量灰度值对其进行半定量分析。四、统计学处理所有数据资料用SPSS13.0进行处理,各组计量资料的结果采用t检验,P＜0.05有统计学意义。结果1、GIRK1、2 mRNA在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达GIRK1 mRNA在正常宫颈组织中表达的灰度值比值的平均值为0.0254,与宫颈癌组织中的1.5483相比,有显著性差异(P＜0.01)。GIRK2 mRNA在正常宫颈组织中表达的灰度值比值的平均值为0.3865,与宫颈癌组织中的1.8339相比,有显著性差异(P＜0.01)。2、GIRK1、2 mRNA表达与宫颈癌临床病理资料间的关系GIRK1 mRNA在高分化癌中表达为0.9857、中分化为0.8564,与低分化的1.8638相比,有显著性差异(P＜0.05)。GIRK1 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为0.9894,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期中表达为1.9752,两者有显著性差异(P＜0.01)。GIRK2mRNA在高分化癌中表达为1.2250、中分化为0.8611,与低分化的2.0539相比,有显著性差异(P＜0.01)。GIRK2 mRNA在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期中表达为1.1872,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期中表达为2.5321,两者有显著性差异(P＜0.05)。GIRK1、2 mRNA的表达与患者的年龄无统计学意义(P＞0.05)。3、GIRK1、2 mRNA在宫颈癌放化疗前后组织中的表达情况GIRK1 mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.3710,与放化疗后的0.2939相比,有显著性差异(P＜0.01)。GIRK2 mRNA在放化疗前的宫颈癌组织中表达为1.9581,与放化疗后的0.5704相比,有显著性差异(P＜0.01)。结论1、GIRK1和GIRK2基因参与宫颈癌细胞增殖。2、GIRK1和GIRK2基因表达水平与宫颈癌的临床分期及病理分级呈正相关,与宫颈癌的恶性进展及预后有关。3、GIRK1和GIRK2基因的表达水平在宫颈癌放化疗后明显降低。