母猪妊娠期饲粮添加硒蛋氨酸羟基类似物对后代仔猪肠道健康的影响

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胎儿早期肠道发育会影响其一生的健康,而母体营养对胎儿肠道发育具有重要意义。本研究旨在探讨母猪妊娠期饲粮添加2-羟基-4-甲基硒丁酸(HMSeBA)对后代仔猪肠道抗氧化能力、硒蛋白表达、内质网应激、炎症及自噬水平的影响及其可能机制。首先,选取45头体重和背膘相近的二元杂交(LY,长白×约克夏)经产母猪(胎次为5),在配种后随机分配到三个处理组:对照组(n=15)、Na2Se O3组(n=15)和HMSeBA组(n=15)。母猪妊娠期饲喂相应的处理饲粮直至分娩。屠宰新生仔猪(n=10)及出生后21天(n=6)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)攻毒4 h后的断奶仔猪,分析其血液中炎症因子水平,检测其肠道样本形态、硒蛋白表达水平及抗氧化能力、内质网应激水平、炎症水平和自噬水平。其次,敲低猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中GPX4或SELS基因以研究GPX4或SELS是否介导HMSeBA对猪肠上皮细胞内质网应激信号的调控作用。结果表明,与对照组和Na2Se O3组相比,母体日粮添加HMSeBA显著增加了新生仔猪回肠的绒毛高度和绒隐比值(VCR,P<0.05)。此外,与未攻毒组相比,LPS攻毒2 h上调了断奶仔猪血清中IL-1β和IL-6的水平(P<0.05)。而与对照组攻毒仔猪相比,HMSeBA组仔猪在LPS攻毒2 h后血清中IL-1β和IL-6的浓度更低(P<0.05)。LPS攻毒还降低了断奶仔猪空肠及回肠紧密连接相关蛋白ZO-1和Occludin的m RNA水平(P<0.05),而母体HMSeBA的添加显著缓解了这一效应(P<0.05)。进一步研究表明,母体补充HMSeBA显著增加了(P<0.05)新生及断奶仔猪空肠GSH-Px的活力,降低了新生仔猪空肠、回肠MDA及H2O2的含量(P<0.05)。另外,与对照组相比,母体添加HMSeBA显著上调了新生仔猪回肠GPX2的蛋白水平以及断奶仔猪空肠SELS和SEPP1的蛋白水平(P<0.05),并且降低了新生及断奶仔猪回肠中炎性细胞因子IL-1β和NF-κB的基因表达(P<0.05)。细胞上的研究表明,与对照组相比,1200 n M HMSeBA处理24 h显著上调了猪肠上皮细胞中GPX4和SELS基因表达及蛋白丰度,以及细胞中GSH-Px的活力(P<0.05)。并且,HMSeBA预处理24 h还降低了H2O2诱导的猪肠上细胞中的ROS水平、H2O2和MDA的含量及内质网应激相关信号(P<0.05)。进一步使用sh GPX4和sh SELS进行基因敲低实验,结果发现GPX4和SELS同时敲低会阻断HMSeBA缓解猪肠上皮细胞内质网应激信号的过程。综上所述,母猪妊娠期饲粮中添加HMSeBA能够提高后代仔猪肠道硒蛋白的表达及抗氧化能力,缓解LPS诱导的炎症、自噬和内质网应激信号,从而提高后代仔猪肠道健康水平。
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