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哺乳动物X染色体连锁基因表达上的剂量差异,是通过雌性胚胎发育早期一条X染色体的失活(XCI)来平衡的。XCI包括印记型失活和随机型失活两种形式,其过程很复杂,包括启动、计数、选择、失活、维持等一系列的步骤。X染色体失活中心(XIC)是XCI的调控开关,包含许多与XCI有关的基因元件,重要的是Xist和Tsix。
Xist和Tsix对X染色体失活的调控是通过RNA来起作用的。它们都转录非编码的RNA。Xist RNA覆盖在X染色体上,抑制该染色体上基因的表达,失活整条X染色体。Tsix RNA则抑制Xist RNA的转录,维持X染色体的活性。这些顺式元件的调控作用是与相关转录因子的反式作用密切相关的。目前的研究发现转录调控因子如Ctcf、Yy1、Oct4、Sox2、Nanog可结合到Xist和Tsix的的一些位点,调控它们的表达,从而间接影响XCI。
调控XCI的转录因子研究还不深入,转录调控机制以及新的转录因子的发现逐渐被受关注。研究发现在Xist的启动子区、第一个内含子区和Tsix的启动子区存在着很多DNAseI超敏感位点(DHS),这些位点是转录因子调节的重要区域。课题就是从Xist的这些DNAseI超敏感位点出发,采用凝胶迁移(EMSA)、亲和纯化、质谱分析的实验方法在体外探寻新的调节Xist的重要转录因子,并在体内进一步研究其功能。这将对阐述X染色体的失活机制有重要作用,为X染色体失活紊乱相关疾病的治疗奠定理论基础。