【摘 要】
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本研究分离了辣椒白绢病致病菌和对其有拮抗作用的13株木霉菌,用对峙实验法筛选得到最强抑菌效果的菌株13号菌,并研究了培养条件对13号菌生长状态的影响,结果显示:13号木霉菌
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本研究分离了辣椒白绢病致病菌和对其有拮抗作用的13株木霉菌,用对峙实验法筛选得到最强抑菌效果的菌株13号菌,并研究了培养条件对13号菌生长状态的影响,结果显示:13号木霉菌是一株较能耐热耐酸性菌,环境温度达到50℃时也能生长。在中性或偏酸性环境下,13号木霉生长速度极快,在偏碱性的条件下生长则会受到抑制。光照时间也是影响13号木霉生长的一个重要因素,强日光照射处理6h不会对木霉生长产生影响,强光照处理9h以上时会对其有抑制作用。13号木霉菌生长迅速,利于同病原菌竞争生存空间和营养物质,有利于其发挥抑菌作用。用真菌鉴定通用引物ITS1和ITS4扩增13号木霉菌的核糖体DNA ITS序列,PCR产物测序结果在Genbank中比对,结果显示其与登录号为EU280124.1的菌株ITS序列同源性为100%,说明分离得到的13号木霉菌与登录号为EU280124.1的菌株同属于一种,为钩状木霉,根据比对结果,建立了13号木霉及相关菌株的系统进化树。为进一步研究木霉对致病菌的抑制机理,用还原糖法测定了13号木霉不同发酵时间几丁质酶活力的变化,结果表明其在培养45h几丁质酶活力达到最大。同时用电子显微镜观察对峙实验中木霉、购买的纯几丁质酶和经发酵提取的几丁粗酶液对辣椒白绢病致病菌菌丝的降解作用,结果表明三种处理都能降解和破坏辣椒白绢病致病菌的菌丝,能够使其菌丝表面降解或断裂,使菌丝表面呈褶皱状,由此,可以判定木霉产生的几丁质酶是其生防作用最要的机制之一。
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