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前言： 恶性胶质瘤的治疗一直是神经外科学的重点和难点。化疗是其主要的治疗手段之一。替莫唑胺是目前已经得到大样本临床试验证实的治疗恶性胶质瘤的有效药(尽)管替莫唑胺可有效治疗恶性胶质瘤的，但是由于其本身的细胞毒作用并没有取得令人满意的控制效果。因此，寻找肿瘤化疗辅助药物，提高替莫唑胺疗效，改善患者的生活质量、提高生存率，是治疗恶性胶质瘤的重要课题。表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-Epigallaocatechin-3-gallate，EGCG)是绿茶的主要成分。多项研究显示，EGCG可逆转肿瘤多药耐药性(Multipledrug resistance，MDR)，有(肿)瘤的耐药细胞对化疗药物的敏感性。对EGCG和替莫唑胺单独应用抑制胶质瘤的作用已有大量研究结果，但大部分研究结果只是阐明了药物作用的生物学效果，具体的分子生物机制一直都不是十分明确。关于EGCG联合替莫唑胺对胶质瘤细胞的作用目前未见报道，因此本研究旨在观察EGCG联合替莫唑胺对胶质瘤细胞U87MG的增殖、凋亡的影响，并初步探讨其可能的机制。 实验方法： 1.MTT法检测U87MG细胞活力; 2.倒置显微镜下观察U87MG细胞形态; 3.流式细胞术定量检测U87MG细胞凋亡率; 4.Westem-blot检测NF-kBp65及survivin蛋白表达。 实验结果: 1.EGCG对人恶性胶质瘤U87MG细胞活力的影响 不同浓度EGCG(1μM，3μM，10μM，30μM，100μM，300μM)，作用相同时间，随着EGCG浓度的增加对细胞活力影响增加，相同浓度的EGCG分别作用24，48及72h，随着作用时间延长EGCG对细胞活力抑制程度增加。以上结果提示EGCG以时间、浓度依赖性模式抑制人恶性胶质瘤U87MG细胞活力。 2.EGCG联合替莫唑胺对U87MG细胞增殖的影响 与对照组比较，30μ M EGCG和100μ M替莫唑胺单独处理48h后，U87MG细胞增殖明显抑制(p＜0.05)。30μ M EGCG和100μ M替莫唑胺联合处理瘤细胞后，细胞增殖抑制较EGCG和替莫唑胺单独处理均更明显。 3.EGCG协同替莫唑胺诱导人恶性胶质瘤U87MG细胞凋亡 与对照组相比，EGCG30μM，替莫唑胺100μM及联合处理组作用48h后细胞凋亡率均明显增加，差异均具有显著性(p＜0.05)，其中联合处理组作用最显著。 4.EGCG和替莫唑胺联合处理对U87MG细胞内Survivin的表达水平的影响 与对照组相比，100μ M替莫唑胺处理48 h后，U87MG细胞内Survivin蛋白的表达水平较对照明显增加(p＜0.05)。与此相反的是，30μ M EGCG显著抑制了Survivin的表达水平(p＜0.05)。30μ M EGCG和100μM替莫唑胺联合处理48小时之后，与对照组相比，Survivin蛋白的表达显著降低(p＜0.05)。 5.EGCG和替莫唑胺联合处理抑制U87MG细胞内NF-kBp65的表达水平 与对照组相比，100μ M替莫唑胺处理48 h后，U87MG细胞内NF-kBp65蛋白的表达水平较对照轻度增加(p＞0.05)。30μm EGCG单独处理或联合100μM替莫唑胺处理48 h之后，U87MG细胞内NF-kBp65蛋白的表达水平较对照明显减少(p＜0.05)，且联合处理组降低更明显。 结论: EGCG联合替莫唑胺作用，比EGCG，替莫唑胺单独应用更有效的抑制诱导恶性胶质瘤U87MG细胞增殖，促进其凋亡;二者在抑制U87MG细胞增殖诱导其凋亡方面发挥了协同作用。 EGCG联合替莫唑胺抑制恶性胶质瘤U87MG增殖促进其凋亡的协同作用机制可能与其抑制替莫唑胺诱导的NF-kB p65及survivin表达上调有关。