梭状芽孢杆菌对呕吐毒素诱导的生长猪小肠PCNA、ghrelin和Hsp70表达的干预效应

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengliming33645
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)又名呕吐毒素(Vomitoxin,VT)对畜牧养殖业的健康发展带来了极大的威胁,造成了巨大的经济损失,但因毒性大而分子结构稳定,有很强的耐酸性和耐热性,所以目前市场上并没有针对DON脱毒效果显著的脱毒产品。本研究旨在验证梭状芽孢杆菌作为解毒菌对DON诱导的生长猪小肠PCNA、ghrelin和Hsp70表达的干预效应,为梭状芽孢杆菌的开发应用提供详实的理论依据。试验选取4月龄体重为55.58±1.83kg的健康PIC父母代生长猪40头,随机分为5组(n=8),组间初始体重差异不显著(p>0.05)。对照组饲喂基础日粮(DON:371.2μg/kg,AFB1:1.56μg/kg,FB1:256.3μg/kg,ZEA:145.16μg/kg),纯DON组饲喂基础日粮+呕吐毒素大米(DON:5429.31μg/kg,AFB1:3.42μg/kg,FB1:283.98μg/kg,ZEA:210.16μg/kg),纯DON+梭状芽孢杆菌组:基础日粮+呕吐毒素大米+15mL/kg梭状芽孢杆菌,自然DON组:基础日粮+自然霉变小麦(DON:1904.44μg/kg,AFB1:1.59μg/kg,FB1:325.7μg/kg,ZEA:196.08μg/kg),自然DON+梭状芽孢杆菌组:基础日粮+自然霉变小麦+15mL/kg梭状芽孢杆菌。预试验期7d,试验期28d,试验结束屠宰取其十二指肠、空肠及回肠。通过HE和IHC以及WB方法观察小肠的形态学变化及PCNA,ghrelin和Hsp70蛋白分布以及表达量的变化规律,分析梭状芽孢杆菌对DON的脱毒效果。试验结果表明:(1)与对照组相比,纯DON组生长猪的平均日增重降低,平均日采食量升高,但影响不显著(P>0.05)。组织学结构观察发现DON导致小肠绒毛缩短,隐窝深度增加,小肠黏膜上皮脱落,十二指肠段损伤状况最为严重;IHC及WB结果显示:DON抑制小肠黏膜上皮PCNA表达,并促进了小肠腺PCNA的蛋白的表达量,其中十二指肠最明显;DON提高了小肠绒毛黏膜上皮细胞及小肠腺分泌ghrelin、Hsp70的能力,ghrelin以空肠最显著,Hsp70以十二指肠表达最显著。梭状芽孢杆菌的添加提高了猪的平均日增重,平均日采食量趋于对照组水平,小肠绒毛损伤状态得到了一定程度的恢复;小肠绒毛上皮的PCNA的蛋白表达量趋于对照组水平,小肠腺的阳性反应减弱,下调了ghrelin以及Hsp70的蛋白表达量,接近对照组水平。(2)自然DON组的平均日增重及平均日采食量显著降低(P<0.05),自然DON明显抑制小肠绒毛的生长发育,导致绒毛长短不一整体长度变短,隐窝深度增加,以十二指肠最为明显。IHC以及WB的结果显示:自然霉变小麦产生的DON毒素抑制小肠绒毛上皮表达PCNA,同时小肠腺的阳性反应增强,其中十二指肠最显著,并促进小肠上皮细胞及小肠腺的ghrelin和Hsp70的分泌,上调其蛋白表达量,其中回肠最明显;梭状芽孢杆菌的添加显著提高了平均日增重以及平均日采食量,接近对照组水平,并对自然DON所导致的绒毛形态损伤起到了一定的恢复作用;IHC以及WB的结果显示:梭状芽孢杆菌使小肠绒毛上皮的PCNA阳性细胞数量增加,同时减弱了小肠腺上的阳性反应,并下调了ghrelin及Hsp70的蛋白表达量,接近对照组水平。结论:梭状芽孢杆菌对DON导致的小肠组织学形态改变及PCNA、ghrelin和Hsp70表达的异常变化起到了正向干预的效应。
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