碳源对芽孢杆菌产芽孢效应的研究

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芽孢是产芽孢杆菌在一定培养条件或生长阶段下形成的抗逆性很强的休眠体,对热、干燥、辐射和有机溶剂等都有抗性。本文以地衣芽孢杆菌01957、枯草芽孢杆菌TS-02、高地芽孢杆菌WY150和凝结芽孢杆菌NJ-01四种常用的生防芽孢杆菌为对象,分析了Biolog系统GenⅢ微平板的71种碳源对四种芽孢杆菌菌体生长量、生长周期,以及产生芽孢的影响,并在摇瓶水平上确定了各种芽孢杆菌的产孢条件。主要研究结果如下:1.基于Biolog表型分析,发现不同芽孢杆菌的碳源代谢能力及产芽孢与碳源代谢综合能力都大。根据利用较好的碳源种类排序为:枯草芽孢杆菌TS-02(31种)>地衣芽孢杆菌01957(25种)>高地芽孢杆菌WY150(17种)>凝结芽孢杆菌NJ-01(6种)。根据产芽孢与碳源代谢综合能力的碳源种类排序为:地衣芽孢杆菌01957(11种)>枯草芽孢杆菌TS-02(6种)>高地芽孢杆菌WY150(4种)>凝结芽孢杆菌NJ-01(0种)。2.不同芽孢杆菌的最适生长曲线和产芽孢的碳源也差异较大。地衣芽孢杆菌01957的最差和最适产芽孢碳源分别D-山梨醇和N-乙酰-D-葡糖胺;枯草芽孢杆菌TS-02最适生长和产芽孢的碳源为蔗糖和α-D-葡萄糖;高地芽孢杆菌WY150芽孢产量较多的碳源为L-苹果酸和α-D-葡萄糖;而凝结芽孢杆菌NJ-01芽孢产量较多的碳源为L-苹果酸、D-苹果酸和L-乳酸,以L-乳酸芽孢产量最高,达98%。3.以上述Biolog结果为参考,在摇瓶水平上确定了不同芽孢杆菌的最适菌体生长和产芽孢的碳源。地衣芽孢杆菌01957的最适碳源为L-鼠李糖,芽孢产率为3.658%;枯草芽孢杆菌TS-02的最适碳源为水苏糖,芽孢率高达62.88%;高地芽孢杆菌WY150的最适碳源为肌苷,培养24小时芽孢率达35.67%;凝结芽孢杆菌NJ-01的最适碳源为L-乳酸,芽孢率高达99.47%。4.以葡萄糖作为基础碳源,确定了不同芽孢杆菌最适菌体生长和产芽孢的碳源组合。地衣芽孢杆菌01957以葡萄糖、肌苷和L-鼠李糖为碳源时,芽孢产量大约提高了 10倍,产孢率高达90%以上;枯草芽孢杆菌TS-02以水苏糖为碳源时芽孢产量也在90%以上;高地芽孢杆菌WY150以肌苷组合为碳源时芽孢率达60.47%;而凝结芽孢杆菌NJ-01的L-乳酸组合芽孢率为68.24%。本研究在Biolog微平板和摇瓶水平上分析了不同碳源对四株芽孢杆菌菌体生长及产芽孢量的影响,确定了最适的单一碳源以及碳源组合,为芽孢杆菌的工业生产提供了重要的理论参数,在基础研究和应用方面都具有重要的意义。
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