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【研究目的】1.明确未经治疗的年轻女性厌食症(anorexia nervosa,AN)患者SLC6A4基因甲基化特点及其与临床症状的影响;2.探索AN患者临床症状改善后SLC6A4基因甲基化的变化及其对临床症状变化的影响;3.探索与AN有关的家庭环境因素对该基因甲基化及临床症状的影响。【内容与方法】本研究共纳入符合入、排标准的未治疗年轻女性AN患者(n=91)及匹配的正常对照(normal control,NC,n=87)。基线时评估所有被试的SLCA64基因甲基化水平及临床症状;部分AN患者(AN=51)进行为期12周的门诊常规治疗随访,并检测SLC6A4基因甲基化水平、外周血mRNA表达及血小板5-HT水平、评估临床症状;部分被试(AN=40,NC=41)同时接受家庭环境相关评估。SLC6A4基因甲基化检测采用MassARRAY-EpiTYPER DNA甲基化分析技术;外周血mRNA表达水平检测采用Taqman探针法;血小板5-HT水平检测采用高效液相色谱法检测。通过BMI、EAT-26和EDE-Q6.0量表评估进食障碍相关临床症状;通过家庭环境量表中文版(FES-CV)、父母养育方式评价量表(EMBU)评估家庭环境及父母教养方式。【结果】1.横断面分析——未治疗AN患者SLC6A4基因启动子区甲基化特点及其对临床症状的影响(AN=91,NC=87):(1)未治疗AN患者的SLC6A4基因启动子区为高甲基化状态,CpG3、CpG4、CpG6和平均甲基化水平(CpG_mean)显著高于NC组(p值均<0.05);(2)与NC组相比,AN组的mRNA表达及血小板5-HT水平显著低下(p值均<0.05),AN患者的SLC6A4基因启动子区平均甲基化(CpG_mean)与mRNA表达有负相关的趋势(r=-0.277,p=0.065);(3)AN患者的CpG3的甲基化水平与EDE-Q6.0总分有显著正相关(r=0.226,p值<0.05)。2.纵向随访分析——SLC6A4基因启动子区甲基化变化及其对AN患者的临床症状变化程度的影响(门诊常规治疗12周后,AN=28):(1)未发现AN患者的SLC6A4基因启动子区甲基化水平在治疗后有显著变化(p>0.05),治疗后该基因mRNA表达显著增加,血小板5-HT水平显著降低,BMI、EAT-26总分、EDE-Q6.0总分均显著改变(p值均<0.05);(2)SLC6A4基因的基线CpG_mean与治疗前后mRNA表达差值呈显著正相关(r=0.407,p=0.004),与血小板5-HT水平无关,CpG4位点的甲基化水平与治疗前后EDE-Q6.0总分的减分程度有正相关的趋势(r=0.310,p=0.078);(3)纳入发病年龄、病程等协变量综合分析,发现基线CpG4位点的甲基化水平对AN进食障碍症状严重程度(EDE-Q6.0总分)的影响不再显著(p>0.05)。3.回顾性分析——家庭环境因素对未治疗AN患者SLC6A4基因启动子区甲基化水平及临床症状的影响(AN=40,NC=41),发现:(1)EMBU中父亲的拒绝否认、过度保护教养方式的因子分均与CpG3位点的甲基化水平呈正相关(r=0.425,p=0.038;r=0.362,p=0.048);(2)FES-CV的亲密度因子得分与EDE-Q总分(r=-0.291,p=0.050)呈显著正相关;EMBU的(父亲)拒绝否认、(父亲)过度保护均与EDE-Q总分显著正相关(r=0.330~0.437,p值均<0.05);(3)综合分析家庭环境及CpG3位点的甲基化水平对AN患者症状严重程度(EDE-Q6.0)的影响,仅发现父亲过度保护对EDE-Q6.0的影响显著(p=0.030)。【结论】1 SLC6A4基因甲基化参与AN的病理机制,且未经治疗AN患者的SLC6A4基因为高甲基化水平、低mRNA表达水平;2 AN患者经过短期治疗症状改善后,SLC6A4基因甲基化水平无变化,未发现该基因甲基化对临床症状改善程度的预测效应;3父母养育方式与AN的临床症状的严重程度有关,与SLC6A4基因甲基化水平无关。