【摘 要】
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目的:探索以人自体大隐静脉内皮细胞及骨髓间充质干细胞构建组织工程心脏瓣膜(TEHV)的可行性,为将来的临床应用奠定基础。方法:分别采用胶原酶消化法及组织块法体外分离培养
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目的:探索以人自体大隐静脉内皮细胞及骨髓间充质干细胞构建组织工程心脏瓣膜(TEHV)的可行性,为将来的临床应用奠定基础。方法:分别采用胶原酶消化法及组织块法体外分离培养大隐静脉血管内皮细胞(hECs)及肌成纤维细胞(hMFbs),用密度梯度离心法分离培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs),并在体外向内皮细胞诱导分化(hMSC-ECs),鉴定细胞表型及功能;应用胰酶结合核酸酶消化法制备去细胞猪主动脉瓣膜支架,研究支架去细胞效果、生物力学及动物在体植入的生物学行为;探索理想的TEHV构建方法,并在体外脉动应力条件下三维培养构建整体TEHV。结果:人自体大隐静脉来源的hECs、hMFbs及骨髓来源的hMSCs均在体外成功分离、培养及扩增;以hMSCs生长能力较强,获取较为简便,且已初步具备内皮细胞功能:酶消化24小时可以制备完全去细胞支架,体内外生物力学测定效果满意;种子细胞来源及支架预处理方法均明显影响构建的TEHV功能,应用体外应力三维构建TEHV后种子细胞功能明显增强。结论:hECs及hMSCs均可成为TEHV的种子细胞,二者均可在体外应力条件下在去细胞猪主动脉瓣膜支架上生长并成功构建TEHV,虽然hMSCs整体细胞功能稍低于hECs,但其特殊的生物学性质可以作为极有希望的种子细胞选择。TEHV在体生物学性状尚需进一步研究。
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