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目的:免疫功能低下是肿瘤患者的普遍临床特征,免疫逃避是肿瘤快速恶化的重要机制,其分子机制亟待深入研究。本文旨在探究非炎症条件下B淋巴细胞对肝癌发生发展的影响作用。方法:通过对H-ras12V原癌基因在肝细胞中的特异性表达而诱导形成的H-ras12V转基因肝癌小鼠模型进行研究,探索B、T淋巴细胞和IgG1/2在肝癌发生发展中的变化规律及对肝癌发生发展的影响作用。1.对3、5、9月龄H-ras12V转基因肝癌小鼠及正常C57BL/6J小鼠进行剖检,观察和统计肝脏的病变情况。2.采用流式细胞法(FCM)分别检测3、5、9月龄H-ras12V转基因肝癌小鼠及正常小鼠的外周血中B、T淋巴细胞比例和活性水平。3.检测3、5、9月龄H-ras12V转基因肝癌小鼠和正常小鼠的血清中IgG1和IgG2的水平变化。4.将H-ras12V转基因小鼠和正常小鼠交配获得杂合转基因小鼠,待9月龄时检测其与纯合转基因小鼠外周血中B、T淋巴细胞的变化和肝癌发生发展状况。5.使用BTK选择性抑制剂PCI32765处理H-ras12V转基因肝癌小鼠6个月后,检测其对外周血B、T淋巴细胞和肝癌发生发展的影响。6.使用IGF-1处理H-ras12V转基因肝癌小鼠6个月后,检测其对外周血B、T淋巴细胞和肝癌发生发展的影响。结果:1.B淋巴细胞数量在3和5月龄转基因小鼠中显著降低,而T淋巴细胞无明显变化;但在拥有大量恶性肿瘤的9月龄转基因小鼠中,B和T淋巴细胞的数量和活化水平都显著降低。2.血清中IgG1/2的水平在5和9月龄转基因小鼠中显著降低,而且IgG2水平的变化与B淋巴细胞数量变化的趋势呈正相关;B淋巴细胞的数量和IgG2的水平与肝肿瘤的发展进程和肝细胞中ras原癌基因的表达水平呈负相关。3.相比杂合转基因小鼠,纯合转基因小鼠的B淋巴细胞数量和IgG2水平显著升高,同时肝结节的发生率降低,而腺瘤和肝癌无显著变化。4.PCI32765处理小鼠后,显著降低了B淋巴细胞数量和IgG2水平,同时肝结节的发生率显著升高,而腺瘤和肝癌无显著变化。5.IGF-1处理小鼠后,显著增加了B淋巴细胞数量和IgG2水平,同时肝结节和肝癌的发生率显著降低,而腺瘤无显著变化。结论:1.B淋巴细胞和IgG2可能主要抑制肝癌的发生,而不是肝癌的发展。2.肝细胞中ras原癌基因的特异性表达可能对B淋巴细胞具有抑制作用;而发展后的肝肿瘤对B、T淋巴细胞都有抑制作用,使机体免疫功能降低,形成免疫逃避,从而有利于肝肿瘤的进一步恶化。