CD34~+细胞体外诱导分化为T细胞的实验研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:bingjilin1986
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文利用脐带血分离出造血干/祖细胞,研究其在体外定向诱导分化为T淋巴细胞,从而证明造血干/祖细胞具有向T淋巴细胞分化的能力。并为研究T细胞生物学特性及细胞免疫提供技术平台。应用MACS方法分离人脐带血CD34~+细胞接种到人胎儿胸腺基质单层细胞上,IMDM液体培养基含20%人AB血清并加入FL、IL~12、IL-7和IL-2细胞因子组合,于培养7、14、21、28、35、42天取非贴壁细胞用PBS洗两遍,利用流式细胞仪对细胞免疫表型进行检测。培养4周后的T淋巴细胞进行PHA、IL-2非特异性抗原刺激,瑞士染色观察细胞形态。培养5周后的T淋巴细胞进行肿瘤细胞杀伤实验。结果:2周后,CD4~+CD8~+非成熟T淋巴细胞占细胞总数的0.3%~13.3%,4~5周CD4~+CD8~+T淋巴细胞达到高峰占16.6%~26.5%,且CD3~+CD4~+CD8~-和CD3~+CD4~-CD8~+T淋巴细胞逐渐增多,6周后达26.5%~64.9%和11.6%~38.9%。培养成熟的T淋巴细胞经PHA+IL-2刺激后细胞数量增多至3~5倍,瑞氏染色鉴定可见大原始淋巴细胞存在,T细胞转化为淋巴母细胞,细胞内可见核仁,部分细胞出现有丝分裂现象。培养成熟的T淋巴细胞杀伤肿瘤细胞K562杀伤率570nm和490nm的光密度(OD)分别为19.44%和10%。因此,利用人脐血CD34~+细胞体外接种到人胎儿胸腺基质单层细胞上加FL、IL-12、IL-7和IL-2细胞因子组合条件下,可诱导分化出T淋巴细胞,并且培养的T细胞对有丝分裂素刺激有增殖反应以及具有杀伤肿瘤细胞的效应。从而为T细胞的基础免疫学研究及临床治疗需要提供了研究及应用素材。这项研究也证明了脐带血可以作为多潜能造血干/祖细胞的替代源,具有向T淋巴细胞分化的能力,对扩大基因治疗和移植研究范围具有深远意义。
其他文献
电视媒体是国家文化软实力的重要组成部分,同时也是国家提升软实力的重要方式。一个国家的媒体发展状况如何,关系着一个国家的软实力,影响着一个国家的综合国力。随着中国的
民众应该怎么办普通乘客乘坐火车时,应对列车出现非正常行驶现象做出预先判断,如多次紧急刹车、列车剧烈晃动、车厢出现倾斜等,应予以高度警觉。列车出现故障可能导致脱轨甚
期刊
粉尘爆炸,指粉尘在爆炸极限范围内,遇到热源(明火或温度),火焰瞬间传播于整个混合粉尘空间,化学反应速度极快,同时释放大量的热,形成很高的温度和很大的压力,反应速度逐渐加
在市场竞争日益激烈的今天,服务质量已经成为企业成功不可或缺的要素之一,没有及时把握服务质量水平现状并加以持续改进,企业就难于在竞争中胜出。因此,建立一套测量企业服务质量
龙卷(又称龙卷风)一般产生于强对流风暴内部,由风暴云底向下伸展到地面,进一步发展为漏斗状云,从而生成小范围空气涡旋,其中心最大风速可达100~200米/秒,直径一般为几米到几
No.20耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)"超级病菌"感染病MRSA是一种能引起危及生命的皮肤和血液感染的葡萄球菌,在人体皮肤或者鼻子内生存,严重情况下会感染人体血管,破坏肌肉
从良种选择、土地的选择和整地、合理增施有机肥、地膜覆盖作畦种植、适时早播、合理施肥、田间管理、病虫草害防治等方面总结了玉米高产栽培技术。
<正>随着社会的进步,时代的发展和人们物质生活水平的不断提高,各种铺张浪费现象比较严重。据报道,国人每年在餐桌上浪费的食物相当于两亿多人一年的口粮!其它方面的浪费也比
期刊
食品添加剂在不少人的认知里属于负面名词,只要一提到食品添加剂,就会跟"不健康"联系在一起。于是,一些宣称"无添加"的食品就备受追捧。实际上,很多食品添加剂都是我们吃了好
现代潜艇特别是核潜艇因具备潜深大、航程快、隐蔽性好的特点,正逐渐成为各国实施海洋威慑的"杀手锏"。水面舰艇在与潜艇的博弈中往往因自身发动机或螺旋桨产生噪声而导致声