死亡相关蛋白3(Death associated protein 3,DAP3)在胃癌中的表达及其意义

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近来胃癌的发病率仍居高不下,在我国居恶性肿瘤发病率和死亡率前列。研究胃癌的凋亡机制有助于了解胃癌的发生、发展以及转归等生物学特性,开拓胃癌治疗的新手段。死亡相关蛋白(Death Associated Protein,DAP)是一组凋亡蛋白家族,其中死亡相关蛋白激酶和组织蛋白酶D已被广泛研究,而死亡相关蛋白3(DAP3)由于与肿瘤坏死因子超家族成员诱发的凋亡密切相关,最近研究较多。本文旨在通过体外实验和体内实验观察死亡相关蛋白3(DAP3)在胃癌中的表达并探讨TRAIL、rh-TNFα和5-FU等药物对其的影响;观察DAP3与caspase8的关系,探讨DAP3参与药物引起胃癌凋亡的可能机制;并观察人胃癌组织中DAP3表达与TRAIL的受体DR4、DR5表达的关系,以临床验证DAP3与TRAIL治疗胃癌的关系以及探讨DAP3检测的临床意义。 一、死亡蛋白3(DAP3)在人胃癌细胞株BGC-823和HGC-27中的表达以及TRAIL、rh-TNFα和5-FU对其影响 [目的]观察死亡蛋白3(DAP3)在人胃癌细胞株BGC-823和HGC-27中的表达以及TRAIL、rh-TNFα和5-FU对其影响,探讨DAP3对于胃癌发病学的意义以及在药物治疗胃癌中的指导作用。 [方法]体外培养人胃癌细胞株BGC-823和HGC-27,先以不同浓度的TRAIL(0、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)、rh-TNFα(0、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)和5-FU(0、10-6M、10-5M、10-4M)作用48小时后,酸性磷酸酶法测定OD值,确定TRAIL、rh-TNFα和5-FU的治疗浓度;再以治疗浓度的TRAIL、rh-TNFα和5-FU作用于人胃癌细胞株BGC-823和HGC-27,Western blot法测定治疗前后DAP3的表达变化情况。 [结果]1、0、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml的TRAIL作用于BGC-823 48小时后OD值分别为0.565±0.039、0.555±0.049、0.339±0.044和0.214±0.051,作用于BGC-823 48小时后OD值分别为0.771±0.039、0.751±0.043、0.419±0.047和0.231±0.059,统计学分析显示50ng/ml的TRAIL和对照组OD
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