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目的：Notch信号通路主要影响细胞的生长、增殖和分化，其异常激活常常与肿瘤的发生相关，但是有关Notch诱导肿瘤发生的分子病理机制还不完全清楚。本课题以液体肿瘤急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）和实体肿瘤胰腺导管癌（PDA）为研究对象，通过细胞生物学和分子生物学等研究方法，研究Notch直接调控靶基因的分子机制，考察Notch阻断剂抑制癌细胞增殖的活性。这项工作不但有助于深入了解Notch诱导肿瘤发生的分子机制，而且有望为新型肿瘤分子靶向治疗提供新思路。方法：鉴定Notch信号通路在T-ALL中的新型靶基因：用γ分泌酶抑制剂GSI或负显性DNMAML1封闭小鼠T-ALL细胞中的Notch信号通路，然后分别检测新靶点重组激活基因（Rag1和Rag2）mRNA的表达水平和蛋白质的表达水平。随后利用染色体免疫共沉淀测序技术（ChIP）鉴定Notch是否能直接结合Rag1或Rag2基因表达调控区。Notch信号通路影响胰腺导管癌细胞生长增殖的功能和机制研究：用MTT法测定GSI对胰腺癌细胞增殖的抑制作用；然后用同样方法测定GSI是否协同化疗药物吉西他滨对不同恶性程度的胰腺癌细胞增殖的抑制作用。最后的机制研究亦采用实时荧光定量PCR技术检测靶基因c-Myc、Hes1、Jagged1和Jagged2的mRNA含量。结果：鉴定Notch信号通路在T-ALL中的新型靶基因：实时荧光定量PCR和Western Blot的结果显示，GSI处理的小鼠T-ALL细胞G4A2和T6E中Rag1和Rag2mRNA的表达水平和Rag1蛋白质的水平都发生了显著下调；DNMAML1转染的T6E细胞中，Rag1和Rag2mRNA的表达水平明显下降。染色体免疫共沉淀的结果显示进入细胞核内的Notch能与Rag2基因上游的转录调控区结合。Notch信号通路影响PDA细胞生长增殖的功能和机制研究：MTT法检测显示， GSI能抑制多种胰腺导管癌细胞的增殖，但程度不显著；当GSI和传统化疗药物吉西他滨联合用药时，癌细胞的数量明显减少。实时荧光定量PCR的结果显示Notch信号通路下游基因c-Myc、Hes1、Jagged1和Jagged2mRNA的表达水平都有了不同程度的下降，在不同恶性程度的PDA细胞中靶基因受调控的程度不同；其中Hes1mRNA的表达水平在各种PDA细胞中都有较大程度的下降，而c-Myc在恶性程度较高的癌细胞中下调明显。结论：在急性T淋巴细胞白血病细胞中，我们发现并验证了两个Notch信号通路能直接调控的靶基因Rag1和Rag2。在胰腺导管癌细胞实验中，GSI抑制胰腺癌细胞增殖的作用不显著，与吉西他滨协同用药后能抑制恶性程度较高的PDA细胞的增殖。Hes1在各种PDA细胞中都有较大程度的下降，c-Myc仅在恶性程度较高的肿瘤细胞中下调较明显，提示它们为Notch下游介导重要功能的靶基因。