论文部分内容阅读
目的:应用免疫性大鼠肝纤维化模型进行研究,与大黄蛰虫丸对照观察桂枝茯苓丸加味对肝纤维化大鼠TGF-β1及CTGF表达的影响,分析桂枝茯苓丸加味对肝纤维化的防治作用,为该药的临床应用、推广提供较为科学的实验依据。方法:雄性SPF级大鼠60只,体重180-200g。随机分为6组:正常对照组、模型对照组、大黄蛰虫丸对照组、桂枝茯苓丸加味低剂量组、桂枝茯苓丸加味中剂量组、桂枝茯苓丸加味高剂量组。采用未灭活猪血清腹腔注射,每周两次,每次0.5ml/只(正常对照组以生理盐水代替猪血清),第10周末停止腹腔注射。造模同时予以大黄蛰虫丸、桂枝茯苓丸加味低剂量、桂枝茯苓丸加味中剂量、桂枝茯苓丸加味高剂量灌胃,每日1次,每周称重后调整药物用量。第10周末停止造模,空腹24小时称重,2%戊巴比妥麻醉后仰卧位固定,解剖,称重,并于肝右叶取1.5cm×1cm×0.5cm肝组织,各组取材部位基本一致,10%甲醛溶液固定,自动脱水机脱水,石蜡包埋切片。免疫组化方法测定肝脏TGF-β1及CTGF的表达。结果:1.桂枝茯苓丸加味能显著降低肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1的表达。桂枝茯苓丸加味低剂量组可见炎性细胞浸润,肝细胞水肿明显,炎性细胞、间质细胞胞浆内及汇管区表达,较模型组减少。桂枝茯苓丸加味中剂量组可见间质细胞胞浆内、炎性细胞少量表达,较模型组明显减轻。桂枝茯苓丸加味高剂量组肝小叶结构接近正常肝组织,阳性表达主要集中在炎性细胞胞浆内。明显轻于其余治疗组。模型对照组与余各组相比,均有显著性差异(P<0.05);大黄蛰虫丸对照组与桂枝茯苓丸加味中剂量、高剂量组相比,均有显著性差异(P<0.05);大黄蛰虫丸对照组与桂枝茯苓丸加味低剂量组相比,无显著性差异(P>0.05)。桂枝茯苓丸加味加味高剂量组与中剂量、低剂量组相比,均有显著性差异(P<0.05)。2.桂枝茯苓丸加味能显著降低肝纤维化大鼠肝组织CTGF的表达。桂枝茯苓丸加味低剂量组可见肝小叶结构受损、肝细胞变性,汇管区、纤维间隔及周围肝窦壁表达,较模型组减少。桂枝茯苓丸加味中剂量组肝小叶结构受损减轻,可见纤维间隔内、汇管区表达,较模型组明显减轻。桂枝茯苓丸加味高剂量组肝小叶结构受损明显改善,可见极少量汇管区和纤维间隔内表达,明显轻于其余治疗组。模型对照组与余各组相比,均有显著性差异(P<0.05);大黄蛰虫丸对照组与桂枝茯苓丸加味中剂量、高剂量组相比,均有显著性差异(P<0.05);大黄蛰虫丸对照组与桂枝茯苓丸加味低剂量组相比,无显著性差异(P>0.05)。桂枝茯苓丸加味加味高剂量组与中剂量、低剂量组相比,均有显著性差异(P<0.05)。结论:桂枝茯苓丸加味能明显改善肝纤维化大鼠TGF-β1及CTGF的表达,且存在一定量效关系。桂枝茯苓丸加味组在动物实验期间,大鼠未出现明显副作用及不良反应,提示其安全可靠。TGF-β1、CTGF与肝纤维化有着密切关系,并呈正相关,是肝纤维化进展的病理机制之一。