目前有许多常见的食品检测方法,主要包括气相色谱质谱法、液相色谱质谱法、高效液相色谱法以及酶联免疫吸附法等,然而这些方法都需要昂贵的仪器、复杂的前处理以及专业的操作人员,这些特点限制了它们的现场应用。免疫层析试纸条是一种操作简单、快速、结果稳定、价格低廉的检测方法,适宜于样品的现场快速筛查,然而,免疫层析试纸条的检测灵敏度较低,因此,应用受到限制。本研究初步探索了提高免疫层析试纸条灵敏度的方法。本实验以食源性致病菌大肠杆菌O157:H7为研究对象,基于双抗夹心的检测原理,成功建立了胶体金免疫层析信号放大试纸条检测系统。本研究在传统胶体金免疫层析试纸条的基础上,通过添加增敏剂(氯金酸和盐酸羟胺)提高检测信号。利用胶体金试纸条读取仪获得信号放大前后试纸条的检测限分别为为4×104 CFU/mL及5×103 CFU/mL,信号放大后灵敏度提高了8倍,检测时间为20 min;该试纸条与27株非目标菌无交叉反应;以牛奶为食品基质,用试纸条对增菌培养不同时间的样本进行检测,信号放大后的试纸条检出阳性信号的时间比传统试纸条短1.5 h。该试纸条具有快速、灵敏、操作简单、适宜于现场检测的特点,为大肠杆菌O157:H7的高灵敏检测提供了一种新的方法。合适的探针材料是提高免疫层析试纸条检测灵敏度的重要因素。在本实验中,基于竞争抑制的检测原理,成功制备了银金多孔纳米粒子免疫层析试纸条并对克伦特罗进行检测。通过添加不同量的氯金酸到十六烷基三甲基氯化铵包裹的银纳米粒子溶液,制备了不同金银含量以及不同孔径大小的银金多孔纳米粒子,由于获得的银金多孔纳米粒子的表面活性剂带正电,通过添加巯基十一烷酸到十六烷基三甲基氯化铵包裹的银金多孔纳米粒子溶液,成功地将银金多孔纳米粒子的表面电荷从正电荷转变为负电荷。将巯基十一烷酸包裹的不同的银金多孔纳米粒子与抗克伦特罗单克隆抗体分别反应,得到相应的免疫探针,将它们并应用于免疫层析试纸条进行克伦特罗检测。结果显示,随着氯金酸添加量的增加,获得的银金多孔纳米粒子的Ag/Au摩尔比从12.69:1、4.78:1、1.77:1、1:1.02到1:2.17逐渐减少,当银金多孔纳米粒子Ag/Au摩尔比为4.78:1时,对应的银金多孔纳米粒子免疫层析试纸条的检测限最低为2 ng/mL,检测时间为15 min,与传统胶体金免疫层析试纸条相比,灵敏度提高了10倍。优化后的银金多孔纳米粒子制备的免疫层析试纸条为克伦特罗快速、高灵敏检测提供了一种新的方法。