槲皮素、没食子酸对SMMC-7721肝癌细胞PI3K/AKT信号通路影响的探讨

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研究目的:探讨国医大师经验方“抗癌扶正方”中泽漆的单体槲皮素、没食子酸在抗肝癌、促进细胞凋亡方面的作用机制。研究方法:体外培养肝癌细胞SMMC-7721,顺铂为阳性组,观察不同浓度槲皮素、没食子酸对细胞凋亡的作用及其相关机制。采用MTT法检测槲皮素、没食子酸对细胞生长的影响,并观察在不同时间点的细胞形态;利用流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况及细胞周期分布;运用RT-PCR及Western Blot法检测单体对SMMC-7721细胞PI3K/AKT信号通路相关凋亡蛋白表达的影响。研究结果:槲皮素、没食子酸对人肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性。流式结果提示,槲皮素可将SMMC-7721细胞周期阻滞于G0/G1期,并且其凋亡率随浓度增加而逐渐增加;没食子酸可使SMMC-7721细胞周期阻滞于Go/G1期,凋亡率随药物浓度增加的上升趋势不显著。细胞形态观察,药物组细胞呈现不规则形,甚至变圆,体积缩小,细胞结构没有对照组紧密,某些细胞甚至出现脱落、漂浮现象。RT-PCR、Western Blot司亡相关蛋白表达检测表明,药物组AKT的表达受抑制,PTEN、Caspase9蛋白的表达率随着药物浓度的增加而增加。研究结论:槲皮素、没食子酸均能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,其机制可能是使细胞周期阻滞于G0/G1期,PTEN的过表达抑制AKT活化,激活Caspase9从而促进细胞凋亡。PI3K/AKT言号通路的表达,可能是槲皮素、没食子酸诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的机制之一。
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