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研究背景：卵巢癌是妇科常见的高危恶性肿瘤，多烯紫杉醇（Docetaxel，TXT）又称多西他赛是卵巢癌的一线化疗药物。目前常用的TXT溶媒可引起严重的过敏反应，同时全身用药的靶向性不足，从而影响药物疗效，因此需要对TXT的负载系统进行优化改良，以克服药物副作用，提高药物治疗的有效性，来适应临床的需要。CD105是卵巢癌肿瘤组织新生血管的一个重要标志分子，已有研究将其作为化疗药物的靶标可以增强药物的特异性及疗效。以聚乳酸（PLA）为主链联合，联合聚乙二醇（PEG）及生物素的纳米颗粒（TXT-BPLANPs）有着良好的TXT载体表征。因此，我们在前期课题研究（特异性抗CD105单克隆抗体杂交瘤细胞株的研制）的基础上，对特异性CD105单克隆抗体进行了纯化制备与鉴定，并对其进行生物素化。同时与重庆大学课题组合作，将其接合到TXT-BPLA NPs载体上，研究TXT-BPLA NPs的表征及抗体-BPLA对CD105抗原的靶向结合力，并以人卵巢癌细胞SKOV3为模型,研究负载多烯紫杉醇新型TXT-BPLANPs的体外抗肿瘤作用，初步探讨其抑制肿瘤生长及促凋亡机制，为TXT抗肿瘤药的进一步开发应用、降低副作用并提高化疗效果提供新思路及实验依据。研究方法：采用小鼠腹水接种的方法生成了抗人CD105鼠单克隆抗体，测定了该抗体的效价和亲和力，选择亲和力最高的抗体标记生物素。以聚乳酸（PLA）为主链联合，联合聚乙二醇（PEG）及生物素合成生物素接枝改性聚乳酸纳米颗粒（BPLANPs）。采用成熟的生物素-亲和素体系，以亲和素为桥梁，实现BPLA材料与抗体的连接，制备抗体-BPLANPs。BPLA NPs通过自乳化/溶剂扩散技术对TXT进行包裹，制备成新型生物素接枝改性聚乳酸-多烯紫杉醇纳米粒（TXT-BPLANPs），并对其表征。以不同剂量TXT-BPLANPs（1、10、100、1000、10000nmol/L）处理SKOV3细胞不同时间（12、24、48、72、96、120h）后用CCK-8法测定细胞生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，Westernblot检测Caspase-3表达。研究结果：1.6株抗人CD105鼠单克隆抗体纯化的抗体总量在70～121mg之间，平均产量为2.2～3.1mg/mL，其中1-H9、2-G4及2-G9效价达到1:100万以上，2-G9的亲和力为3.36×1010。选择2-G9抗体株与生物素结合，结合率为1.9。2. BPLA NPs的平均粒径161.6nm（范围100～300nm），分散系数PDI为0.117，平均Zeta电位为-37.56mV。BPLA NPs对TXT的平均包裹率为54.91%，平均载药量为11.03%。TXT-PPLA载药纳米粒的2h时TXT的累积释放率为25%，未出现突释现象；8h时累积释放率为51%，达到半数释放；12h后药物释放进入中期扩散阶段，释放速率变缓，过程平稳，96h释放率为64%。抗体-BPLA可以在体外与CD105特异性结合，具有体外靶向性。3.在10～10000nmol/L浓度范围内，相同时间点下，TXT和TXT-BPLA NPs对SKOV3细胞生长的抑制率均呈现出剂量依赖性。在相同浓度下，TXT组在24h和48h对SKOV3细胞的生长抑制率、凋亡率及capase-3的表达均明显高于TXT-BPLANPs组（P<0.05）；72h后，TXT-BPLANPs组对SKOV3细胞的生长抑制率、凋亡率及capase-3的表达均明显高于TXT组（P<0.05）。结论：1.使用小鼠腹水接种法可以高效的生产特异性的鼠抗人CD105单克隆抗体。2.鼠抗人CD105单克隆抗体由于其对肿瘤新生血管的特异性标志物的高亲和力可以用于抗肿瘤药物的靶向引导剂。3. BPLA材料本身制得的纳米空球在体外对细胞没有毒性，且粒径均匀及携带负电荷的特性，是一种安全高效的TXT药物载体。4. BPLA能够有效包裹TXT，实现TXT的缓慢释放，且有着较高的包裹率及载药量。5.以亲和素为桥梁可实现BPLA纳米球与抗人CD105单克隆抗体之间的有效结合，结合后的BPLA纳米球可以在体外与CD105特异性结合。6. TXT-BPLA NPs对人卵巢癌SKOV-3细胞有明显的生长抑制及促凋亡作用，且其药物缓释效应可以对卵巢癌细胞增殖的抑制和凋亡作用更稳定、作用时间更长、更安全。