心肌缺血再灌注损伤（MI／R）是制约急性心肌梗塞患者获取最佳疗效的重要因素，MI／R的发生机制主要认为与心肌能量代谢紊乱、钙超载和氧自由基损伤有关。本课题从离体器官水平探讨丹酚酸B（Sal B）抗心肌缺氧／复氧损伤的保护作用，通过细胞水平探讨丹酚酸B抗心肌缺氧／复氧损伤中钙超载的机制。目的：离体兔心灌流实验确定丹酚酸B对心肌缺氧再给氧损伤的保护作用。此后，围绕Ca²⁺超载环节探讨丹酚酸B抗MI／R的作用机理。通过建立体外培养乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤模型，研究丹酚酸B对心肌细胞钙超载的影响，观察细胞内钙离子浓度[Ca²⁺]i、质膜钙泵、L-型钙通道(I_Ca-L)、肌浆网钙泵（SERCA）活性等指标，进一步阐明其抗Ca²⁺超载的作用机制。方法：离体兔心经改良Langendorff法灌流，并通过缺氧再灌注造成心肌缺氧／复氧损伤模型。全自动生化分析仪测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）活性；测定心肌梗死范围；光学显微镜心肌组织结构改变。体外培养乳鼠心肌细胞经缺氧3h复氧1h，建立心肌细胞缺氧／复氧损伤模型。MTT法检测丹酚酸B对心肌细胞活力的影响。双波长荧光分光光度计测量各组细胞内游离钙离子浓度，激光扫描共聚焦显微镜观测各组细胞内钙的荧光强度；酶试剂盒测定心肌细胞膜Na⁺-K⁺-ATPase，Ca²⁺-ATPase活性；全细胞膜片钳技术观测丹酚酸B对大鼠心肌细胞I_Ca-L的影响；pNPP酶法测定心肌细胞SECRA活力。结果：1．丹酚酸B注射液可减少兔离体心脏缺血再灌注损伤后冠脉流出液中CK、LDH的水平。光镜下观察可见丹酚酸B组心肌组织形态学损伤明显减轻。2．MTT法检测结果显示心肌细胞OD值提高，丹酚酸B提高心肌细胞活力。3．荧光分光光度计检测显示，丹酚酸B可降低受损心肌细胞内过高的钙离子浓度。4．丹酚酸B可提高心肌细胞膜钙泵(Na⁺，K⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase)及SERCA活力。5．丹酚酸B的I_Ca-L的曲线与正常乳鼠心肌细胞、正常分离大鼠心肌细胞、模型大鼠心肌细胞的I_Ca-L相比均无上移，对I_Ca-L无影响。结论丹酚酸B对兔离体心脏缺血再灌注损伤有明显的保护作用。丹酚酸B抗MI／R的机理与其抑制缺氧／复氧损伤时心肌细胞内钙超载有关。心肌细胞内钙离子的代谢途径大致分为两条途径：细胞外钙离子通过L型钙通道、Na⁺，K⁺-ATPase、Na⁺／Ca²⁺交换进入细胞内；细胞内钙池（肌浆网、线粒体等）释放钙离子进入细胞内。丹酚酸B保护心肌细胞活力，抑制心肌细胞内钙离子浓度。提高细胞膜Ca²⁺转运系统Na⁺，K⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase活性影响对心肌细胞的外钙内流途径；提高肌浆网钙泵活性影响心肌细胞的内钙释放途径。丹酚酸B对I_Ca-L无影响。