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根结线虫(Root-Knot Nematodes)是线虫中一类分布广、危害大、难以防治的植物生线虫,由根结线虫危害植物根系引起的根结线虫病是一种世界性分布的土传病害,对作物造成了巨大的经济损失。目前,在农业生产中主要采用化学防治方法防治根结线虫,但化学药剂广泛使用带来了环境污染等一系列的负面效应。近年来,生物防治方法受到越来越多的关注。其中,芽孢杆菌(Bacillus spp.)寄生环境复杂,具有广谱抑菌活性,具有较强的次生代谢产物产生能力,是一种较为理想的生防菌种。 本研究主要从芽孢杆菌AMCC100150防治根结线虫病及发酵条件优化两个方面进行了研究,结果如下: (1)芽孢杆菌AMCC100150发酵上清液对根结线虫二龄幼虫的致死率。结果表明,37℃、180rpm培养48h发酵上清液,处理二龄幼虫(J2)24h,对二龄幼虫致死率达85%。而且,杀线虫活性物质具有较强的热稳定性和pH稳定性。 (2)芽孢杆菌AMCC100150防治黄瓜根结线虫病。结果表明,芽孢杆菌对黄瓜根结线虫有较好的防治效果,生防菌处理黄瓜根部根结数、卵囊数和卵囊内卵数都有所减少,分别减少了30%、44%和53.93%,生防菌AMCC100150有一定的应用潜力。 (3)芽孢杆菌AMCC100150发酵条件优化。本研究从发酵培养基方面对芽孢杆菌的发酵工艺进行优化。首先在16组工业发酵培养基中筛选出该菌株菌体形成量较高的培养基,然后采用Plackett-Burman(PB)试验筛选出影响菌体量的显著因素为玉米粉,豆饼粉和CaCO3。利用中心组合试验对PB试验筛选出的三个显著因素进一步优化,获得最佳发酵培养基配方:玉米粉2.88%,葡萄糖0.5%,豆饼粉1.68%,CaCO30.6%,K2HPO40.03%,MgSO4·7H2O0.02%,MnSO4·H2O0.02%,该条件下该菌株的菌体量可达3.35×109CFU/mL,比优化前提高了27.86%。