研究背景:多发性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）是以单克隆浆细胞在骨髓中大量增生聚集为特征的不可治愈的恶性血液肿瘤。尽管近年来新的治疗方法如蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂、单克隆抗体等被应用于临床,但治疗耐药仍是临床面临的首要难题。目前关于MM耐药发生机制仍无定论,认为多种因素共同导致耐药的发生,如药物关键靶点突变、肿瘤细胞克隆演变及骨髓微环境改变等。其中肿瘤微环境的“自然选择”对于MM耐药至关重要。MM细胞与骨髓微环境中的有形细胞成分及无形细胞外基质相互作用,促进肿瘤细胞增殖及耐药发生。巨噬细胞（Macrophage,Mφs）是MM骨髓微环境中数量最多的免疫细胞,可保护MM细胞免受药物诱导的凋亡,导致耐药发生。我们既往研究发现趋化因子CCL2可大量募集外周血单核细胞至骨髓中分化增殖为Mφs。在本课题中我们将深入探究MM中CCL2对Mφs表型及功能的调控作用及具体分子机制,为克服MM耐药提供新的理论依据及靶点。研究方法:通过免疫组化及ELISA研究CCL2在MM患者中的表达水平及其临床意义。流式细胞术、qRT-PCR及Western Blot用于检测Mφs对MM的保护作用及Mφs的极化表型。通过RNA sequencing研究CCL2引起的Mφs内全转录组表达差异,寻找CCL2诱导的下游关键分子。在Mφs中采用siRNA敲减MCPIP1及慢病毒过表达RNase及DUB酶功能结构域突变的MCPIP1,研究MCPIP1影响Mφs表型及功能的作用及具体分子机制。采用Proteome Profiler Human phosphor-kinase antibody array研究Mφs内CCL2激活的信号通路。体内实验在NSG小鼠模型中开展。结果:1.MM患者体内高表达CCL2,且当初治患者经治疗达到临床缓解时,其骨髓内CCL2含量显著降低。2.MM肿瘤微环境中CCL2主要来源于Mφs,MM细胞可诱导Mφs进一步表达分泌CCL2。3.CCL2增强Mφs对MM细胞的保护作用,使MM细胞免受硼替佐米（Boetezomib,BTZ）及马法兰（Melphalan,MEL）诱导的凋亡,诱导耐药发生。4.不同极化状态Mφs对MM细胞保护作用不同,M2型巨噬细胞保护作用更强,CCL2促进Mφs向M2型极化。5.MM肿瘤微环境中异常升高的CCL2通过激活JAK2/STAT3信号通路诱导Mφs 表达 MCPIP1。6.CCL2诱导Mφs表达的MCPIP1促进Mφs对MM的保护作用,该过程依赖于MCPIP1的RNase及DUB功能结构域。7.体内外实验证实MM肿瘤微环境中异常升高的CCL2通过MCPIP1促进Mφs向M2型极化。结论:本项研究发现MM患者体内高表达CCL2,其含量与患者治疗状态密切相关。MM骨髓微环境中,Mφs是CCL2的主要来源且MM细胞共培养进一步诱导Mφs表达分泌CCL2。MM细胞表面极少表达CCR2受体,CCL2无法通过与受体结合,直接诱导肿瘤细胞增殖或影响其对药物敏感性。但CCL2显著促进Mφs对MM细胞的保护作用,诱导MM细胞耐药发生。不同极化状态Mφs对MM细胞保护作用不同,体内外实验证实CCL2通过促进Mφs向M2型极化,增强其对MM细胞保护作用,诱导耐药。机制上CCL2通过激活JAK2/STAT3信号通路,诱导Mφs表达免疫抑制分子MCPIP1。体内外实验证实MCPIP1通过其RNase及DUB酶功能诱导Mφs向M2型极化,促进Mφs对MM保护作用。