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宿主植物和固氮细菌(nitrogen-fixing bacteria，rhizobia)之间建立的共生关系依赖细菌的Ⅲ型分泌系统(Type three secretion system，T3SS)分泌的Ⅲ型效应因子(T3S effector)。本研究报道了广宿主根瘤菌的y4zC开放读码框(ORF)编码一个新颖的Ⅲ型效应因子，命名为NopT(nodulation outer Protein T)。对根瘤菌NGR234 以及其突变菌株的胞外分泌上清分析表明，NopT通过Ⅲ型分泌系统分泌到胞外。启动子活性实验指出，nopT基因受类黄酮(flavonoids)和转录调控因子TtsI双重调控。在E．coli BL21(DE3)细胞和人胚肾细胞HEK293T(human embryonic kidney 293T)中重组表达的NopT，表现出自我切割的活性(autoproteolytic activity)。原来隐藏在蛋白中间的甘氨酸(Glycine，G50)，暴露于切割后的NopT的N端。计算机分析表明G50是一个潜在的真核细胞十四酰基化位点(mynstoylated site)。对NopT的酶解催化中心(catalytic triad，C93，H205，D220)进行点突变(site—directed mutagenesis)后，大大降低了NopT的自我切割能力，表明nopT基因编码了一个有功能的半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease)，该酶属于YopT-AvrPphB蛋白酶家族。在烟草细胞(Nicotiana tabacum CV．Xanthi)中瞬时表达(transient expression)NopT，能引起烟草细胞的超敏反应(hypersensitive reaction，HR)。该超敏反应依赖NopT的酶解催化中心。转nopT基因的拟南芥（Arabidopsis)出现病态现象，表明NopT对拟南芥细胞有致病作用(cytotoxic effect)。对在大肠杆菌(E.coli)表达的NopT和LjRac2(来自百脉根Lotusjaponicus，属于ROP蛋白家族)(ROR Rho—related GTPase from plants)的共沉降实验(pull-down assay)表明，蛋白酶活性中心位点突变的GST-NopT融合蛋白能够结合LjRac2。这个发现意味着NopT在宿主植物细胞内可以与ROPs相互作用。突变根瘤菌菌株(mutant derivatives of NGR234)在宿主植物上的结瘤实验表明，NopT对菜豆玉豆一号(Phaseolus vulgaris CV．Yudou No．1)和非洲山毛豆(Tephrosia vogelii)的共生固氮是正向的促进作用(positive effect)，而对菽麻(Crotalaria juncea)则是反向的阻碍作用(negative effect)。上述实验结果提示，NopT的多态现象(NopT-related polymorphism)是广宿主根瘤菌NGR234与特定宿主植物互作进化适应(evolutionary adaptation)的结果。