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本论文对金线莲中黄酮类化合物的提取与其含量测定进行研究,同时也对高速逆流色谱(HSCCC)在中草药有效成分的制备性分离纯化方面的应用进行了研究,建立了分离纯化金线莲中活性成分的新方法,并利用高效液相色谱(HPLC),紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振波谱(NMR)等对目标产物的纯度和化学结构进行了分析和鉴定。全文由以下四个部分组成。(一)金线莲黄酮类物质提取及含量测定将金线莲粉末用超声-微波协同提取法进行提取,利用正交设计方法对提取条件进行优化,最佳提取条件为60 %乙醇,提取60 min,微波功率为40 W;建立高效液相色谱法测定金线莲中槲皮素、木樨草素、异鼠李素的含量的方法。以甲醇-水(52:48,v/v,含0.2%磷酸)为流动相,流速为1.0 ml·min-1检测波长为368 nm。对10个产地的金线莲药材中的三种黄酮醇物质的含量进行了测定。(二)HSCCC分离纯化金线莲中的黄酮醇类化合物采用高速逆流色谱技术(HSCCC)分离出槲皮素,为应用逆流色谱分离纯化黄酮醇类化合物提供了理论和应用参数,并为金线莲的深度开发打下基础。两相溶剂系统为:正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(4:6:3:3 v/v),逆流色谱仪转速为850 r·min-1,流动相流速1.5 ml·min-1,固定相保留率在67.6 %。在该条件下,样品分离所需时间为320 min。从2.8 g金线莲粗提物中分离纯化得到15.5mg槲皮素。经HPLC分析,纯度约为96.5 %。其化学结构由UV、IR、MS、1H-NMR数据来确定。(三) HSCCC分离纯化金线莲中的甾醇类化合物采用高速逆流色谱技术(HSCCC),一次性分离出麦角甾醇和豆甾醇,为应用逆流色谱分离纯化甾醇类化合物提供了实验方法。两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水(3.5:0.3:0.5:2.5:0.3,v/v),逆流色谱仪转速为900 r·min-1,流动相流速1.5ml·min-1,固定相保留率为55.4%。在该条件下,样品分离所需时间为360 min,流动相流速、进样量等对豆甾醇和麦角甾醇的分离有一定影响。从2.5 g金线莲粗提物中一步分离纯化得到36.5 mg麦角甾醇和43.6 mg豆甾醇。经HPLC分析,纯度分别为92.0%和95.5%。其化学结构由UV、IR、MS、1H-NMR和13C-NMR数据来确定。(四)高速逆流色谱技术的概况对高速逆流色谱技术的原理及其在天然药物领域的应用进行了综述。