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钩藤(Ramulus Uncariae cum Uncis)是我国传统中药,目前对于钩藤有效成份在心血管治疗方面的认识有限。本课题组应用独创的技术路线从钩藤中提取总生物碱组份(KHR98),体外研究证实其不但具有长效降压作用,还能对抗缺血-再灌注所导致的心肌损伤,缩小心肌梗死面积；抑制成纤维细胞增生,抗组织器官纤维化；抑制血管平滑肌细胞增生,抑制血管壁肥厚；抗氧化,清除自由基,从而保护靶器官的作用(中国发明专利200610116517.2)。本研究通过高效液相制备的方法,经两步液相制备从KHR98中提取分离得到化合物毛钩藤碱(Hirsutine)。在此基础上,以原代培养乳鼠心肌细胞为研究对象,建立心肌细胞缺氧模型,对毛钩藤碱在心肌细胞缺氧损伤方面的保护作用进行了探索性研究。研究内容包括检测细胞存活率(MTT法),检测细胞内乳酸脱氢酶(LDH)活性,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化产物MDA产生水平；通过RT-PCR和Western Blot观察凋亡相关因子mRNA和蛋白的表达；通过Hoechst染色观察凋亡形态学变化。实验结果表明毛钩藤碱对缺氧所致乳鼠原代心肌细胞损伤具有明显保护作用,其作用机制与抗氧化、调控线粒体凋亡途径的关键酶与蛋白表达以及减少缺血心肌细胞凋亡有关,可作为治疗心肌损伤尤其是缺氧心肌损伤心脏病的活性先导化合物做进一步的研究与开发。毛钩藤碱属柯楠属型吲哚类生物碱,具有以C(3)-Hβ、C(15)-Hα和C(20)-Hβ为特征的立体化学结构。20世纪八九十年代Wenker、Lounasmaa和Tietze等研究小组先后报道了毛钩藤碱外消旋体和对映体的合成路线,这些路线存在着步骤冗长、总产率低以及原料和手性催化剂昂贵造成经济效益不高的缺点。本研究以色胺为起始原料,将Pictet-Spengler缩合反应产物中间体3上的胺基先后用Cbz和Boc保护得到中间体5,其在DIBALH的还原作用下生成醛中间体6,中间体6和Meldrum酸及烯醇醚经串联Knoevenagel-杂-Dies-Alde及氢化反应得中间体8,最后中间体8与甲酸甲酯缩合和重氮甲烷甲基化及去Boc完成毛钩藤碱外消旋体的全合成。另外,以L-色氨酸甲酯,D-色氨酸为起始原料,经Pictet-Spengler缩合得到非对映异构体1A/1B,1A/1B经苄基化后得到非对映异构体2A(cis+trans)/2B(cis+trans),非对映异构体2A(cis+trans)/2B(cis+trans)在酸性条件下,其中的顺式异构体2A cis/2B cis由差向异构化作用反转为反式异构体2A trans/2B trans,然后去除2A trans/2Btrans中3位C上的侧链及N上苄基,得到关键对映体3A/3B,3A/3B可先后通过Cbz和Boc保护及DIBALH的还原得到中间体8a/8b,最后通过中间体8a/8b和Meldrum酸及烯醇醚经串联Knoevenagel-杂-Dies-Alde及氢化反应完成毛钩藤碱及其C3位对映异构体二氢柯楠因的对映选择性全合成。本研究首次以色胺为起始原料完成了毛钩藤碱外消旋体的全合成,同时探索了运用差向异构化的方法构建毛钩藤碱和二氢柯楠因C3位立体中心构型的关键对映体3A/3B而合成毛钩藤碱对映体与二氢柯楠因对映体的合成方案,以期为毛钩藤碱的新药开发提供基础。