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第一部分炎症性肠病中IgA/G结合菌群的变化目的:免疫球蛋白A（Immunoglobulin A,IgA）是粘膜产生的主要抗体,IgA结合菌群在炎症性肠病（Inflammatory bowel disease,IBD）发展过程起重要作用。我国IBD患者粪便IgA结合菌群改变,及IgG（Immunoglobulin G,IgG）结合菌群是否也有临床意义尚不清楚。本章检测了IBD患者IgA和IgG结合细菌的百分比,观察了IgA和IgG结合菌群与IBD临床特征的相关性,并检测了IgA和IgG结合阳性和结合阴性菌群的变化情况,以评估IgA/G结合的微生物群的方法是否在IBD的治疗中具有潜在的应用前景。方法:2020年至2021年于广州市第一人民医院消化内科就诊的61名IBD患者及34名健康志愿者作为研究对象被纳入该研究。对患者进行Mayo评分和CDAI评分。收集患者临床数据及血、粪便、结肠组织样本。采用酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测研究对象血浆中IgA和IgG含量。在患者进行肠镜检查的肠道准备之前,留取粪便标本,使用ELISA检测粪便IgA的含量。收集患者肠组织,通过HE染色评估疾病严重程度,通过免疫荧光检测肠粘膜IgA和IgG含量。通过Ig-SEQ进行IBD患者粪便菌群流式分选,得到IgA/G+和IgA/G-细菌,并对分选后的菌群进行16SrDNA测序以分析其结构变化。结果:1.IBD患者肠粘膜产生更多的IgA和IgG。溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）患者粪便中IgA含量高于健康对照组,UC和克罗恩病患者粪便中IgG含量均高于健康对照组。2.IBD病人的IgA/G结合细菌的百分比较健康对照组高。其中,IBD患者IgG结合细菌百分比增高较IgA结合细菌增高更明显。UC患者粪便IgA/G和IgA/G结合菌群百分比相关性具有统计学差异。3.与健康对照组相比,IBD患者IgA和IgG结合肠道菌群多样性和分布不同。与健康对照相比,在IBD患者粪便IgA结合促炎细菌丰度增高,IgA结合有益菌与共生菌丰度下降。4.通过LEf Se（LDA＞4）观察到IgA+Staphylococcaceae和IgA+EscherichiaShigella,Bacteroides可作为CD患者和UC患者潜在的生物标志物。结论:粪便IgA/G结合菌群有望成为评估IBD疾病活动度的潜在生物标志物,IgA结合细菌在IBD患者粪便中丰度增高、群落结构改变,可能在IBD发展过程有重要作用。第二部分溃疡性结肠炎患者FMT前后IgA结合菌群的变化目的:关于IBD患者粪菌移植（Fecal microbiota transplantation,FMT）前后IgA结合细菌改变的研究较少。本节探讨接受FMT治疗的IBD患者IgA结合菌群是否受不同递送方法（包括经肠镜TET置管和胃镜下喷洒）的影响,并分析IBD患者FMT受体中的供体和宿主移植前/移植后IgA结合细菌的变化。方法:分别收集18位UC患者接受FMT治疗前、治疗后4周以及相应供者的粪便进行流式细胞术分选,对分选后的细菌进行16SrDNA测序分析菌落结构的变化。ELISA检测患者粪便中IgA和IgG含量。结果:1.接受FMT治疗后,大部分UC患者IgA和IgG含量有下降趋势,但总体看移植前后IgA和IgG含量并无统计学意义;14/18个患者IgA结合细菌百分比有下降趋势,15/18个患者IgG结合细菌百分比有下降趋势。2.接受FMT治疗后,UC患者中IgA+菌群的有益菌如Faecalibacterium＿prausnitzi等较治疗前升高,促炎菌如Bacteroides＿fragilis等较治疗前下降。3.接受不同供者粪菌移植的UC患者IgA结合菌株的相对丰度和菌群结构有显著不同。4.不同FMT途径如胃镜喷洒和经肠镜TET置管对治疗后患者IgA结合菌群变化无影响。结论:UC患者接受FMT治疗后重建肠道菌群IgA靶向性并趋向供体状态,UC患者接受FMT治疗后的IgA结合菌群的改变与不同供者相关,与递送途径不相关。第三部分DSS肠炎小鼠粪菌移植后IgA结合菌群变化及作用机制初步探讨目的:探讨粪菌移植后Ig结合菌群百分比下降的潜在机制。方法:我们建立了DSS（Dextran sulfate sodium salt,DSS）诱导的急性结肠炎模型,并给予人源粪菌干预（供体来源）。观察FMT干预后小鼠的体重、疾病活动指数、结肠长度和结肠组织学变化,并通过免疫荧光检测了紧密连接蛋白ZO-1和粘液蛋白MUC2。确定人源粪菌对肠炎小鼠炎症情况确有缓解作用后,我们使用PCR检测肠组织IgA类转换因子表达情况,并使用流式细胞术检测小鼠肠道IgA和IgG分泌性B细胞产生情况。结果:FMT干预使急性肠炎小鼠体重下降、疾病活动指数降低、结肠长度缩短及炎症损伤减轻、粘膜紧密连接蛋白ZO-1和粘液蛋白MUC2表达下调减少。FMT后降低了DSS急性肠炎小鼠粪便IgA和IgG结合细菌百分比,也降低了DSS急性肠炎小鼠肠道IgA和IgG分泌型记忆B细胞数量。FMT对小鼠结肠多聚免疫球蛋白受体表达无明显作用,但下调了IgA类別转换相关基因表达。结论:DSS急性肠炎小鼠Ig结合细菌百分比增高可能与Ig分泌增多相关,与p IgR表达无关,FMT可以通过下调Ig分泌降低Ig结合细菌的百分比。Ig分泌增多可能与非T细胞依赖途径介导的IgA类转换相关。