研究背景及目的钙化主动脉瓣膜病（CAVD）是世界范围内常见的瓣膜疾病,随着人口老龄化发病率呈逐年上升趋势,目前针对该病暂无比较好的药物治疗手段,对于重症患者主要治疗方式是主动脉瓣膜置换术（AVR）。生物人工心脏瓣膜（BHV）是目前比较常用的替换瓣膜。目前临床上的生物瓣膜主要由猪心包制成,由于猪心包中存在异种细胞,其传统的交联方式存在一定毒性,此类瓣膜耐久度较差且容易钙化。而脱细胞处理可以通过去除异种细胞来部分地减少钙化,但是脱细胞后胶原纤维和ECM的暴露易导致血栓形成和血小板粘附,造成瓣膜钙化。内皮化是解决脱细胞直接局限性的有效手段,因为新的内皮层能提供多功能屏障,能抑制血栓形成和炎症反应。因此,促进脱细胞生物瓣的内皮化至关重要。石莼多糖是一种天然的硫酸化多糖,具有抗血栓形成和抗炎的特性,并且有类肝素的作用,可通过其肝素结合位点来固定蛋白质。内皮细胞钙粘蛋白抗体和REDV多肽可以促进选择性内皮细胞附着,粘附和增殖。在这项研究中,我们通过石莼多糖作为介质,设计了内皮细胞钙粘蛋白抗体和REDV多肽功能化修饰的脱细胞生物瓣,以促进脱细胞生物瓣内皮化从而提高其耐久度。研究方法将猪心包依次进行脱细胞处理、戊二醛交联后,共价接枝石莼多糖,然后通过其活性基团接枝抗体和多肽,制备成功能性的脱细胞生物瓣。通过X射线光电子能谱（XPS）,荧光,傅立叶远红外的方法,我们对制备完成的生物瓣进行表征分析。其次,我们通过测定HUVECs粘附/选择性粘附和增殖情况,来评估生物瓣对内皮细胞的亲和力,通过溶血试验和血小板粘附试验来验证生物瓣体外的生物相容性和抗血小板能力,通过ELISA测定RAW 264.7巨噬细胞在生物膜表面释放炎症因子的水平来评估生物瓣抗炎能力,通过扫描电镜能谱分析检测生物瓣表面沉积的钙结节从而来评估生物瓣体外抗钙化能力,以及通过大鼠背部植入试验来进行生物瓣体内内皮化水平以及炎症水平的评估。研究结果在生物瓣表征实验中,傅立叶远红外光谱分析和XPS分析证明了生物瓣表面成分的变化和石莼多糖的接枝,荧光试验证明了抗体以及多肽的成功接枝。在生物瓣生物功能学实验中,我们发现,相对于对照组（未修饰组）,石莼多糖,REDV多肽以及内皮细胞钙黏蛋白抗体修饰的脱细胞生物瓣能选择性促进体外内皮化（内皮细胞（HUVECs）的粘附、增殖以及生长）以及体内内皮化（促进CD31 阳性内皮化细胞浸润）能力,能有效减少血小板的粘附,具有良好的体外抗钙化能力以及良好的体内/体外抗炎能力。结论:石莼多糖,REDV多肽以及内皮细胞钙黏蛋白抗体修饰的脱细胞生物瓣具有良好的抗血栓形成,抗炎以及促内皮化潜能,具有潜在的临床应用价值。