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随着抗菌药物在水产养殖中的广泛使用,水产养殖源细菌的耐药性逐渐变强,耐药多样性也渐渐增加,进而促使动物细菌性疾病的控制效果变差。气单胞菌是主要的水产动物致病菌之一,容易引起败血症、疖疮和溃疡等出血性疾病。抗菌药物的使用,是诱导气单胞菌耐药性的主要因素。本文以水产养殖源气单胞菌为研究对象,对其耐药性、耐药基因的分布特征及传播机制进行研究分析。本研究中,49株气单胞菌对8类17种抗菌药物的药敏结果显示,对AMX的耐药率高达100%,对SMZ、TMP、SXT和RIF的耐药率介于60%~90%之间,而对CTX、NEO、DOX以及喹诺酮类的ENR、NOR和OFL的耐药率均低于15%;在所有菌株中,41株菌株对3类及以上的抗菌药物具有抗性,24株菌株对9种及以上抗菌药物具有抗性。最小抑菌浓度(MIC)检测结果显示,TMP和SMZ的MIC50值最高(2048μg/mL),其余按MIC50值高低依次为STR(64μg/m L)、CHL(32μg/mL)、NEO(16μg/m L)、TET(16μg/mL)、FFL(16μg/mL)、DOX(4μg/mL)、ENR(1μg/mL)。最小杀菌浓度(MBC)检测结果显示,TET、TMP、SMZ ENR和NEO的MBC50与MIC50相等,CHL、STR和DOX的MBC50(64、256、和8μg/m L)则高于MIC50。抑菌圈直径与MIC值的相关性研究发现,两者之间均呈对数或指数负相关。25种耐药基因的PCR检测结果显示,基因组中,blaTEM的检出率最高(83.7%);其次是sul1和aadA,检出率分别是69.4%和61.2%;再者是arr2/3、aphA1、tetC、sul2、dfrA5和floR,检出率均高于40%。质粒中,sul1的检出率最高,为51%;其次是aphA1与aadA,分别为40.8%和38.8%;blaTEM、tetB、qnrB、qnrS、dfrA7、cat1和cmlA均未检出,其余耐药基因检出率均在35%以下。5类可移动元件的PCR检测结果显示,在基因组中,intI1检出率最高(65.3%);其次是IS26、ISCR2和tnpU,分别是63.3%、57.1%和51%;其余均低于50%。质粒中,intI1检出率依旧最高,为57.1%;其次是IS26、ISCR2和merA,检出率介于20%~35%之间;其余均低于15%。在1型整合子的可变区中,共发现13种基因盒排列,dfrA12-orfF-aadA2比例最高。ISCR2的可变区主要为两种:ISCR2+glmM+sul2(10株)和ISCR2-like+strB+strA+sul2(2株)。本研究中共获得16株大肠杆菌转化子、21株气单胞菌转化子和4株大肠杆菌接合子。转化实验结果显示,耐药基因aadA、aphA1、sul2、tetA和floR较易通过转化的方式传递给大肠杆菌,其中tetA基因阳性转化子均表达四环素抗性;维氏气单胞菌转化子新增表型以RIF抗性为多,嗜水气单胞菌转化子多新增STR、KAN和CHL抗性,结果表明这4种药物抗性较易通过转化在种内进行传播。接合实验结果显示,只有嗜水气单胞菌成功与大肠杆菌接合,基因strA-B和floR较易通过接合在种间进行传播,且基因型阳性接合子均表达出对应抗性。此外,所有的转化子与接合子中,ISCR2的检出率均是最高的。